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背景:急性髓系白血病（Acute Myeloid Leukemia,AML）是起源于造血系统的恶性肿瘤性疾病,其特征是髓系祖细胞过度增殖,导致不成熟前体异常聚集,同时,正常成熟血细胞的生成不足。作为以一种异质性很强的恶性疾病,其发生迅速,恶性程度高,预后较差。虽然近年来对于AML的认识不断提高、治疗方案不断改进,但其仍然是白血病相关死亡的主要原因。因此,揭示其潜在的发病机制、识别新的生物标志物、提高治疗效果,是目前亟待解决的问题。长链非编码RNA（Long non-coding RNAs,lnc RNAs）被认为是基因组转录的“噪音”,是RNA聚合酶II转录的副产物,不具有生物学功能。然而,近年来的研究表明,lnc RNA参与了X染色体沉默,基因组印记以及染色质修饰,转录激活,转录干扰,核内运输等多种重要的调控过程,并且已被证明与多种疾病相关。研究发现,长链非编码RNA lnc RNA-结直肠肿瘤差异表达基因（colorectal neoplasia differentially expressed,CRNDE）与多种恶性肿瘤相关,或在其中作为竞争性内源性RNA（ceRNA）发挥作用。亦有研究报道CRNDE在AML中表达升高,但是其在AML中的作用及具体分子机制尚不十分明确。目的:构建以CRNDE为起点的ceRNA网络;确定CRNDE在AML中的表达水平及生物学功能;确定CRNDE、has-miR-148a、PIAS2的ceRNA调控表达水平,探究其对AML患者总体生存率的影响;阐明及验证AML中CRNDE竞争性结合hsa-miR-148a进而调节PIAS2表达的关系。材料与方法:第一部分:通过生物信息学分析,构建以CRNDE为起点的ceRNA网络。第二部分:Real-time PCR技术检测AML细胞株中及AML患者骨髓标本中CRNDE,hsa-miR-148a及PIAS2的表达水平。并探索基因表达水平与AML患者临床病理特征之间的关系。第三部分:在AML细胞株中通过瞬时转染si-CRNDE,敲低CRNDE的表达水平,并检测CRNDE对AML细胞株的增殖、凋亡的影响。在AML细胞株中单独转染si-CRNDE或hsa-miR-148a mimic,以及共转染si-CRNDE和hsa-miR-148a mimic,Realtime-PCR检测干扰CRNDE对hsa-miR-148a及mRNA PIAS2的影响,并以Western blot检测转染前后mRNA PIAS2的表达水平变化。在293T细胞共转染PIAS2野生/突变质粒和hsa-miR-148a mimic后通过双荧光素酶报告分析,检测hsa-miR-148a对PIAS2的抑制作用,验证PIAS2确为hsa-miR-148a的下游靶基因。以上全部数据结果均采用SPSS19.0及Graph Pad7.0进行数据分析,以p≤0.05视为有统计学意义。结果:1、在构建CRNDE的ceRNA网络基础上,筛选得到PIAS2作为CRNDE的下游靶基因,与AML患者预后不良有显著相关性。2、CRNDE在AML细胞株及AML患者中表达上调。PIAS2在AML细胞株及AML患者中表达上调,同时hsa-miR-148a在AML细胞株及AML患者中表达下调。基因表达水平与AML患者的性别、年龄、FAB分型、预后分期等均无显著相关性。3、干扰CRNDE能够抑制AML细胞增殖,促进凋亡。4、干扰CRNDE使hsa-miR-148a表达增高、PIAS2 mRNA水平及蛋白表达水平减低。过表达hsa-miR-148a时PIAS2 mRNA水平及蛋白表达水平减低。同时干扰CRNDE及过表达hsa-miR-148a时PIAS2 mRNA水平及蛋白表达水平亦减低。5、Hsa-miR-148amimic抑制PIAS2-3’UTR载体的荧光素酶活性,而对PIAS2-3’UTR-Mut载体的荧光素酶活性没有抑制作用。Hsa-miR-148a能够与下游mRNA PIAS2结合。结论:在本研究中,我们发现CRNDE和PIAS2在AML患者骨髓血单个核细胞及细胞系中表达均升高。PIAS2与AML患者预后呈负相关。CRNDE能够增强AML细胞的增殖、抑制其凋亡。Hsa-miR-148a在AML中患者骨髓血单个核细胞及细胞系中表达下调。CRNDE能够调节hsa-miR-148a和PIAS2的表达。Hsa-miR-148a直接靶向PIAS2。Hsa-miR-148a参与CRNDE调节PIAS2的表达。CRNDE可能以内源性竞争RNA的方式通过竞争性结合hsa-miR-148a,进而调节PIAS2的表达,参与AML的与预后调控。