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植物内生真菌(Endophytic fungi)是指在某一时期生活在健康植物体内但对寄主植物组织并不引起明显侵染的真菌。某些内生真菌能产生与宿主相似的活性代谢产物而成为新药的来源之一。内生真菌数量庞大,其作为一种新型的微生物资源,已成为人们关注的热点。 本文以药用植物为研究对象,研究其内生真菌多样性及其产活性代谢产物状况,主要由以下三部分研究内容组成。 一、从浙江临安天目山自然保护区和清凉峰自然保护区采集到共89种药用植物,并从中分离到1142株内生真菌,分析了不同植物种类及不同植物器官中分离到的内生真菌数量的差异,并为进一步研究奠定了基础。 二、用分子生物学方法对分离自南方红豆杉(Taxus mairei)、香榧(Torreya grandis)和三尖杉(Cephalotaxus fortunei)的共52株的镰刀菌属(Fusarium sp.)内生真菌进行分类鉴定,分析了这3株植物中不同种类的镰刀菌属内生真菌的分布状况。发现从红豆杉、香榧和三尖杉中分离到的镰刀菌属内生真菌包含9个已知镰刀菌种或分支和5种疑似的新种或分支:F.’Lateritium Clade ⅡC’、F.sp.A、F.sp.B、F.sp.C、F.sp.D。从这3株植物中分离到的镰刀菌属内生真菌的种类和数量均有较大的差异。用MID液体培养基对部分菌株进行培养,对其培养液进行研究后发现有3株南方红豆杉和香榧来源的镰刀菌F0021、F0042和F0081能够产生抗癌药物紫杉醇。 三、对3株能产生新型抗生素——木霉菌酯素的南方红豆杉来源的木霉属(Trichoderma sp.)内生真菌F0869、F0870和F0986进行鉴定,发现这3株木霉同属于一个木霉新种(Trichoderma taxii sp.nov.),用RAPD方法筛选到了该种的特有序列。研究还对木霉菌酯素的抑菌活性进行测定,发现其对立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)和灰葡萄孢(Botrytis cinerea)具有很强的抑制作用,其对灰葡萄孢抑菌活性比已知抗生素两性霉素B要高。