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第二部分实验(Part 2 Experiment)一番茄蓝光受体基因Phototropins RNAi和Overexpression植物表达载体的构建番茄蓝光受体是介导番茄植株在高频和低频蓝光下的胚轴向光弯曲，生长，叶绿体移动，叶片伸展，气孔开闭等必须生理活动的蛋白。其结构为N末端有两个都能够和发色团黄素单核苷酸(flavin mononucleotide，FMN)结合的LOV结构域，C末端有Ser／Thr蛋白激酶结构域，具有光激活的自磷酸化。因其在植物体中具有重要意义，但在番茄中研究尚不深入，故本实验根据数据库中其片断基因序列设计出用于RNA干扰载体的引物，根据这两个引物再构建分别针对番茄PHOT-1和PHOT-2的RNAi载体。由于番茄蓝光受体还没有登录到数据库的全长序列，而要构建其过表达的载体就必须知道其序列全长，故利用快速获得cDNA末端(RACE)的方法获得其全长，并且构建过表达载体。二番茄蓝光受体Phototropins RNAi植物表达载体的转化番茄研究(The research of RNAi vector of tomato phototropins transfering to tomato)番茄转化目前最成熟的方法是通过农杆菌介导，转染番茄的子叶，转染后，通过相应抗性培养基的筛选培养，获得转基因植株，称为叶盘法，这种方法使用方便，对试验条件要求不高，且外植体再生率比较高，故成为国内外最普遍使用的研究手段。本实验也是使用的该方法，同时分别分析研究了最佳发苗方法，最佳转染条件等试验因数，得到了一些有意义的数据。