【摘 要】
：
背景与目的甲亢伴肝损害是甲状腺功能亢进常见并发症之一,临床表现为肝功能异常、黄疸、肝脏肿大等症状。目前国内用药以抗甲状腺药（ATDs）为主,而ATDs治疗过程中会造成肝损害,因此,临床急需抗甲亢及护肝药物。因宁片是南方医科大学南方医院院内制剂,在临床上作为治疗甲亢伴肝损害药物使用多年,疗效确切,具有很好的抗甲亢及护肝作用,发展潜力巨大。然而因宁片中君药昆明山海棠药材在中药复方制剂中的定性鉴别研究尚
【基金项目】
：
广州市科技计划产学研协同创新重大专项No:201604020113；
论文部分内容阅读
背景与目的甲亢伴肝损害是甲状腺功能亢进常见并发症之一,临床表现为肝功能异常、黄疸、肝脏肿大等症状。目前国内用药以抗甲状腺药（ATDs）为主,而ATDs治疗过程中会造成肝损害,因此,临床急需抗甲亢及护肝药物。因宁片是南方医科大学南方医院院内制剂,在临床上作为治疗甲亢伴肝损害药物使用多年,疗效确切,具有很好的抗甲亢及护肝作用,发展潜力巨大。然而因宁片中君药昆明山海棠药材在中药复方制剂中的定性鉴别研究尚未完善且因宁片作用机制亦未完全清楚。本文采用薄层色谱（TLC）法对中药复方制剂因宁片中的昆明山海棠药材进行了定性鉴别研究同时以甲亢伴肝损害大鼠为研究对象,探讨因宁片对甲亢的药效及护肝作用机制。方法（1）制备因宁片供试品、阴性对照品及昆明山海棠对照药材溶液,照《中国药典》（2020版）TLC法（通则0502）,吸取阴性对照品溶液10 μL、因宁片供试品溶液20 μL和昆明山海棠对照药材溶液1 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正己烷:乙酸乙酯（5:1）为展开剂,展开后取出晾干,紫外光366 nm下检视。（2）SD雌性大鼠60只,以L-甲状腺素（800μg/kg·d）制备甲亢模型,设置正常对照组、甲亢模型组、因宁片低剂量组（0.6 g/kg·d）、中剂量组（1.2 g/kg·d）、高剂量组（2.4g/kg·d）、阳性药抑亢丸组（1 g/kg ·d）,每组10只,正常对照组灌胃等量生理盐水;造模21 d检测血清T3、T4、TSH,肝功能指标,检测甲亢模型是否制备成功;实验期间每日记录体重;实验结束后收集血清、肝脏及甲状腺;采用全自动生化仪检测肝功能指标;酶联免疫吸附法检测T3、T4及TSH水平;HE染色观查肝脏和甲状腺组织病理学变化;免疫组化检测Dio I在肝脏中的表达量变化;Western Blot检测肝脏组织内质网应激通路蛋白表达量变化;RT-PCR检测肝脏组织内质网应激通路RNA表达水平。（3）利用衣霉素激活HepG2细胞内质网应激信号通路,CCK-8法检测不同浓度因宁片浸膏（2.5、5、10mg/ml）和衣霉素（1、2、3、4、5 ug/ml）对HepG2细胞增殖率的影响,筛选最佳给药浓度;ROS试剂盒检测因宁片浸膏对HepG2细胞内ROS产生的影响;Western Blot检测内质网应激相蛋白的表达量;免疫荧光检测HepG2细胞内GRP78、Bax、Bcl-2蛋白荧光强度;流式细胞术检测因宁片浸膏对衣霉素诱导HepG2细胞凋亡的保护作用。结果（1）以正己烷:乙酸乙酯（5:1）为展开剂进行展开,色谱斑点居中,且色谱斑点清晰、分离度较好;系统耐用性试验表明:该方法对不同厂家薄层板、温度、湿度耐受性良好,达到鉴别因宁片中昆明山海棠预期目标。（2）造模第21 d,模型组大鼠T3、T4、AST、ALT、ALP水平明显升高。表明甲亢肝损伤大鼠模型制备成功。最后实验结果表明:因宁片能使大鼠体重增长恢复正常;降低血清T3、T4水平;降低肝功能ALT、AST、ALP、TBIL、DBIL、IBIL水平;改善甲状腺滤泡细胞增生和细胞融合现象;减轻肝细胞肿胀症状,恢复肝索正常形态;降低内质网应激通路中GRP78、ATF6、PERK等蛋白表达量。（3）体外实验结果表明:因宁片浸膏能抑制衣霉素对HepG2细胞内质网应激信号通路激活,降低GRP78、ATF6、JNK等蛋白表达水平;降低HepG2细胞ROS水平;降低由于内质网应激通路激活造成的GRP78、Bax、Bcl-2荧光强度升高;抑制内质网应激通路激活造成的细胞凋亡。结论TLC法专属性强、操作简便,研究结果可为含有该药材的中药复方制剂产品质量标准研究提供参考与借鉴。因宁片能降低甲亢大鼠血清中T3和T4水平,降低肝功AST、ALT及ALP水平,改善甲亢大鼠甲状腺及肝脏病理损伤,降低肝脏组织DioI水平,对甲亢伴肝损害呈现良好的保护作用。因宁片可能通过抑制内质网应激通路的促凋亡,减少肝细胞凋亡,从而起到保护肝脏的效果。
其他文献
[目的]本研究旨在基于将肝脏组织标本的胶原结构特征与偏振光检测相结合的策略,通过得到的偏振光检测图像,进行对包含相关参数的穆勒矩阵进行分解,并结合纹理特征分析方法,建立具有更准确和更定量更动态的分期方法,以解决在慢性肝病患者纤维化的病理组织活检评估中尚未满足的需求的问题。探究穆勒矩阵偏振光学成像及其定量检测技术在辅助分期肝纤维化的作用和应用价值。[方法]随机大鼠肝纤维化造模后,获得各期大鼠肝纤维化
目的:本研究的目的是（1）基于大样本人群水平的数据库鉴别出骨关节炎相关的核心肠道菌群,并验证这些肠道菌群是否介导了代谢综合征及其组分与骨关节炎之间的联系;（2）验证服用二甲双胍是否与伴有糖尿病或/和肥胖的膝骨关节炎患者全膝关节置换风险及膝关节疼痛程度的降低有关。方法:第一部分,肠道菌群介导代谢综合征及其组分与骨关节炎之间的联系研究,我们首先从“广东省肠道微生物项目”（GGMP,n=7009）数据库
随着人口老龄化的增长,全世界的癌症发病率和死亡率正在迅速增长,人们越来越重视癌症的治疗。化疗是当前癌症治疗中最常用的方法之一。但传统的化疗药物存在特异性差,全身毒性强,血液清除快,在体液中的溶解度差等问题,从而制约了化疗药物对肿瘤的治疗效果。随着纳米医学的发展,将纳米粒子用作抗癌药物递送载体可以精确地靶向肿瘤组织、控制抗癌药物的释放以及降低抗癌药物的全身毒性。在本论文中,我们合成了含有环糊精单元的
在实现中国式现代化的进程中，碳达峰的提出，既是可持续发展战略，同时也为各行业在新时代的创新发展指明了方向。历史遗留矿山的治理是我国碳达峰和生态文明建设的重要组成部分。历史遗留矿山为更好地落实这一目标，提出了绿色治理的理念。本文在阐述碳达峰目标及绿色治理的基础上，对碳达峰目标下我国遗留矿山绿色治理的发展现状和趋势进行分析，探究绿色治理的常见的技术，以期为我国遗留矿山绿色治理碳达峰目标的实现，提供参考
目的:探讨血清β-hCG比值（48 h/0h）及内膜厚度预测不明位置妊娠（PUL）患者妊娠结局的临床价值,从而为指导临床下一步诊疗决策提供参考。方法:对2020年期间来我院就诊的PUL孕妇进行前瞻性临床观察,所有孕妇均行经阴道超声测量内膜厚度,观察血清hCG水平变化（0小时和48小时）,计算血清β-hCG比值（48h/0h）,随访至妊娠结局明确（自然流产、宫内妊娠和异位妊娠）。对三种妊娠结局的β-
研究背景:结直肠癌（Colorectal cancer,CRC）是人类消化系统中最常见的恶性肿瘤之一,由于早期患者临床症状较为隐匿,初诊时多已出现肿瘤转移。手术及放化疗是目前治疗结直肠癌的主要方法,然而由于手术切除具有创伤性、危险性及局限性,化学疗法存在全身性毒副作用且易出现耐药,放射治疗也可导致局部正常组织损伤等缺点,结直肠癌的治疗效果及预后仍不理想。近年来,传统中草药及其有效成分的抗癌、调节免
背景:帕金森病（PD）是第二个最常见的神经退行性疾病,全世界有600多万人患有PD。PD主要病理改变是神经元内以α-Synuclein（α-Syn）聚集为主的路易小体形成,以及中脑黑质致密部多巴胺能（DA）神经元的进行性丢失,线粒体功能障碍、氧化应激和自噬功能障碍参与了 PD的发病[1]。在遗传性和散发性帕金森病中,线粒体复合体Ⅰ（MCI）功能障碍是DA神经元凋亡和丢失的一个重要原因,而PINK1
“三全育人”的提出，对心理教育而言具有十分重大的意义。对于大学生的心理教育而言，需要家庭、校园、社会的全员关心与努力，无论是在家庭教育、校园教育还是社会工作的全过程中都必须提供对应的心理服务，在大学教育层面上也必须在教育教学的多维度上全面进行。
我国力争分别于2030年、2060年前实现碳达峰和碳中和,而能源结构转型作为实现碳达峰碳中和目标的关键,已经成为统筹国内国际两个大局、引导我国能源结构转型、经济高质量发展的重要组成部分。公共政策作为政府的行为载体,已经成为政府实现一定时期工作目标的重要手段和工具,但由于我国公共政策的顶层设计仍不完善、能源安全与经济发展矛盾突出,以及政策执行偏差等客观情况的存在,导致各级政府、企业、公众等利益主体产