在本论文中,采用氯仿-甲醇法系统考察了水稀释法的操作参数对卵黄除脂率的影响,获得了水稀释法的最佳脱脂工艺为:利用去离子水将卵黄溶液稀释6倍,调节pH至5.0,在-20oC冷冻8 h后,4oC离心5 min,最小离心力为1200×g,经上述处理后,除脂率可达100%。利用参数扫描超滤技术对脱脂后的IgY粗溶液进行了分离和纯化研究。考察的超滤工艺有两种:(1)利用100-kDa再生纤维素膜进行单步分离。最佳分离工艺条件为:30 mM NaCl + 10 mM磷酸钠缓冲溶液(pH 6.0),搅拌速率600 rpm,流速13.3 L/m2h。利用此工艺获得的IgY纯度为85%,回收率为90%;(2)利用100-kDa聚醚砜膜和100-kDa再生纤维素膜进行二级分离。100-kDa聚醚砜膜的最佳分离工艺条件为:70 mM NaCl + 10 mM磷酸钠缓冲溶液(pH8.0),搅拌速率1200 rpm,流速26.5 L/m2h;100-kDa再生纤维素膜的最佳分离工艺为:70 mM NaCl + 10 mM磷酸钠缓冲溶液(pH4.5),搅拌速率600 rpm,流速13.3 L/m2h。利用此工艺获得的IgY纯度为93%,回收率为85%。通过等点聚焦、电泳、圆二色光谱、红外光谱和抑菌实验等对超滤获得IgY进行了分析和表征,从实验结果可知,IgY的等电点为pI 6.2;IgY分子由两条重链和两条轻链组成,重链68 kDa,轻链28 kDa,IgY的分子量约为192 kDa;其二级结构中β折叠占48%;活性高于盐析法获得的IgY产品。