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目的:研究从金银花以及玄参中分离提取的各单体化合物抗心肌细胞凋亡作用,并阐明其作用机制。 方法:1.利用H2O2刺激乳鼠原代心肌细胞建立心肌细胞氧化应激损伤模型,MTT检测不同处理因素下的细胞活力。2.TUNEL、AnnexinⅤ/PI流式细胞仪检测技术评价药物抗心肌细胞凋亡作用。3.GSSG/GSH含量测定评价药物抗心肌细胞氧化应激作用。4.Real-time PCR检测药物预处理后Caspase9、Caspase3mRNA水平的表达变化。5.Western blot检测活性药物对Caspase3、Cleaved-caspase3、Bcl-2、Bax蛋白水平表达的影响。 结果:1.MTT检测结果显示,金银花提取物JX2-B-6、JX2-B-11以及玄参提取物C-4、C-5、C-22、C-30能明显提高过氧化氢诱导心肌细胞损伤后的细胞活力(P<0.01,P<0.05)。2.TUNEL、AnnexinⅤ/PI检测结果均表明,与过氧化氢组相比,上述各单体化合物预处理组凋亡细胞明显减少,有一定的抗过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡作用(P<0.01)。3.JX2-B-6、JX2-B-11可显著降低GSSG/GSH水平(P<0.05),有抗心肌细胞氧化应激作用。4.JX2-B-11可降低Caspase9、Caspase3 mRNA的表达(P<0.05)。5.JX2-B-11可增加Caspase3蛋白水平的表达,并减少Cleaved-caspase3、Bax/Bcl-2的表达(P<0.05)。 结论:金银花来源的JX2-B-6和JX2-B-11及玄参来源的C-4、C-5、C-22、C-30均有抗过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡作用,其中JX2-B-11发挥这一作用的作用机制可能与线粒体通路介导的凋亡途径中Bax、Bcl-2、Caspase3、Caspase9等的变化有关,而玄参提取物的作用机制尚待进一步研究。