小干扰 RNA(small interfering RNA;siRNA)和微小 RNA(microRNA;miRNA)是小RNA的最主要组成部分。他们与编码蛋白的基因mRNA序列配对,通过降解mRNA或抑制蛋白的翻译而在转录后水平调节基因表达,进而参与细胞内多种生物功能的调节。比如生长发育、细胞增殖与分化、细胞凋亡与应激反应等。研究团队前期的实验研究发现,植物miRNA可以通过日常饮食方式通过动物消化系统被吸收,在其血清、血浆等循环系统中稳定存在,并最终到达各种组织器官中起到调节动物或病毒基因的表达。尽管外源植物性miRNA如何被吸收以及在动物细胞间传输的机制还不甚清楚,但这些发现为我们提供了新的思路,即食物来源的miRNA可以作为一种新的输送药用性沉默RNA的方式。本项目的研究建立了一种模拟植物miRNA成熟方式,利用人工微小RNA(artificial microRNA;amiRNA)技术,在植物中表达外源性乙型肝炎病毒siRNA的体系。通过体内、体外功能学实验验证了在植物中表达的HBV siRNAs(即amiR516和amiR467)可以抑制乙型肝炎病毒表面抗原基因(HBsAg)的表达。长期喂食小鼠植物表达的amiRNAs缓解了 基因持续表达而引起的肝脏病变和机体自身免疫抑制。通过以上研究我们建立了利用植物表达外源性siRNA的技术体系。这一·研究为乙型肝炎病毒的药物开发提供了新的途径,同时此项研究也为未来搭建植物基因工程平台,为未来生产安全的具有临床治疗意义的基因治疗药物提供借鉴。