目的:肾病综合征是肾小球滤过膜通透性异常增高引起的一组临床症候群,高度水肿是其临床特征之一。水肿严重影响患者生活质量,是患者最关注及期待改善的临床症状。水肿是组织间隙体液异常积聚,钠潴留是水肿发生的关键因素。研究表明,肾病综合征钠潴留与纤溶酶介导的上皮钠离子通道异常开放密切相关。临床采用利尿剂治疗肾病综合征水肿,但易发利尿剂抵抗。由三味养血活血药（当归、白芍、川芎）和三味健脾利水药（白术、茯苓、泽泻）组方的当归芍药散为“活血利水”治法治疗水肿代表方剂,改善肾病综合征水肿疗效确切,但其对肾病综合征钠水潴留药效学及药效物质基础不明确。本研究基于确切临床疗效,考察当归芍药散对肾病综合征钠水潴留改善作用、探究其关键靶点及药效物质基础。方法:建立阿霉素和嘌呤霉素氨基核苷诱导的肾病综合征模型,选择可动态观测钠水潴留动物模型,用于考察当归芍药散改善钠水潴留的药效学及作用途径和靶点。根据中医“活血利水”治法及组方药性,将当归芍药散拆方为养血活血组和健脾利水组。选择嘌呤霉素氨基核苷诱导的肾病综合征模型,以尿激酶型纤溶酶原激活物（Urokinase-type plasminogen activator,uPA）和上皮钠离子通道双重阻滞剂盐酸阿米洛利为阳性药,考察当归芍药散全方及其拆方组对尿钠排泄及体液分布的干预作用,并动态观测体重、尿蛋白排泄、尿纤溶酶（Plasmin,Pla）活性及尿纤溶酶原含量时间曲线,以初步评估其药理作用及潜在途径和靶点。基于体内药效学研究结果,结合体外靶点活性抑制实验,考察当归芍药散改善肾病综合征钠潴留作用靶点。基于潜在作用靶点,建立亲和超滤质谱联用方法靶向筛查当归芍药散药效物质基础,结合酶活性抑制实验及分子对接方法验证潜在药效物质基础活性及靶点结合方式,明确当归芍药散改善肾病综合钠潴留药效物质基础。结果:成功建立阿霉素和嘌呤霉素氨基核苷肾病综合征大鼠模型,两种模型均体现肾病综合征临床特征。嘌呤霉素氨基核苷模型大鼠于造模后第5-10天尿钠排泄量显著下降（p＜0.01）,第12天腹水显著增加（p＜0.01）,体液总量及细胞外液显著增加（p＜0.01）。与阿霉素模型相比,本研究关键指标尿钠排泄动态变化及水肿指标,嘌呤霉素氨基核苷模型尿钠排泄下降和腹水更显著且稳定。因此,选择嘌呤霉素氨基核苷肾病模型作为研究模型。体内评价当归芍药散对于肾病综合征钠水潴留改善作用及潜在作用靶点。基于嘌呤霉素氨基核苷肾病综合征大鼠模型,当归芍药散全方及拆方组给药干预12天,结果表明,当归芍药散全方组、养血活血组及健脾利水组不同程度上促进模型大鼠尿钠排泄,缓解钠潴留状态（p＜0.05或p＜0.01）,促钠排泄效果养血活血组最佳,当归芍药散全方组和健脾利水组次之;全方组和养血活血组纠正水代谢异常,二者减少腹水的生成（p＜0.05或p＜0.01）,然而,仅养血活血组纠正模型大鼠体液总量和细胞外液的增高（p＜0.05或p＜0.01）;各给药组对尿液纤溶酶原（Plasminogen,Plg）排泄无影响,但全方组和养血活血组显著降低尿液Pla活性（p＜0.05或p＜0.01）。另外,全方组和养血活血组尿钠排泄增加,与尿液Pla活性的降低基本同步。体外酶活性实验表明,全方组和养血活血组提取液显著抑制Pla活性（IC50分别为107.9mg·mL-1和71.54mg·mL-1）,对于肾脏Pla生成关键酶uPA,二者同样具有显著抑制作用（IC50分别为5.774 mg·mL-1和IC50=1.224 mg·mL-1）。因此,全方组和养血活血组通过干预uPA介导的Pla肾内生成及直接抑制Pla活性发挥改善嘌呤霉素氨基核苷诱导的肾病综合征钠潴留作用。筛查当归芍药散改善肾病综合征钠潴留药效物质基础。基于明确的作用靶点,以uPA和Pla为双靶标,成功建立亲和超滤质谱联用方法,所建立的筛查方法快速可靠,可用于筛查当归芍药散提取液中uPA和Pla亲和化合物。结果表明,没食子酸、没食子酸甲酯、芍药内酯苷及1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖是uPA或Pla的中度或高度亲和化合物。采用酶活性抑制实验验证亲和物质活性,利用分子对接验证亲和物质与酶结合情况,结果表明,1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖对于纤溶酶原激活物和Pla具有双重抑制作用。因此,1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖是当归芍药散改善肾病钠潴留的药效物质基础。结论:本研究成功建立嘌呤霉素氨基核苷诱导的肾病综合征大鼠模型,该模型钠水潴留状态显著。当归芍药散全方组及其拆方组促进嘌呤霉素氨基核苷肾病综合征大鼠尿钠排泄,改善钠潴留状态;全方组和养血活血组显著降低腹水生成;养血活血组显著降低体液总量及细胞外液。全方组和养血活血组通过干预uPA介导的Pla生成及抑制Pla活性促进尿钠排泄,但不改变尿蛋白和纤溶酶（原）的排泄,在体外二者提取液显著抑制uPA和Pla活性。uPA和Pla是当归芍药散改善肾病综合征钠潴留的作用靶点,并以此为双靶标,应用亲和超滤质谱联用方法靶向筛查当归芍药散药效物质,1,2,3,4,6-O-五没食子酰葡萄糖是当归芍药散改善肾病综合征钠潴留药效物质基础。