前体脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化能力的特异化细胞,它持续存在和作用于人类和动物的一生。研究脂肪细胞增殖与分化规律,可为了解人及动物诸多脂肪代谢紊乱性疾病奠定生物学基础。草鱼(Ctenopharyngodon idellus)是中国淡水养殖的四大家鱼之一。当前草鱼等腹腔脂肪过度蓄积问题比较严重,研究草鱼脂肪细胞增殖、分化过程以及与脂肪沉积有关的因素,无论是从养殖生产的经济利益角度,还是从人健康问题出发,都是一项具有现实意义和经济意义的课题。本实验采用组织块法和胶原酶消化法对草鱼脂肪组织进行培养,建立了草鱼前体脂肪细胞培养的优化体系,并对其生物学特性进行了测定。组织块法与消化法均可培养出草鱼前体脂肪细胞,但组织块法培养的原代脂肪细胞中分化为成熟的细胞较少,消化法获得的细胞均匀一致,油红O染色鉴定大部分均可分化为脂肪细胞;在用消化法培养的过程中,采用Ⅳ型胶原酶消化脂肪组织,200目筛网孔径、1000r离心力离心10 min可获得大量的、纯度均一的细胞。本试验还对草鱼前脂肪细胞的离体原代培养进行了初步探索,获得了较为满意的结果,并成功地将草鱼脂肪细胞传至第4代。以此得出草鱼脂肪细胞生物学特性为:前体脂肪细胞的增殖主要在细胞培养的2-5 d,其分化出现在培养的第3天,在细胞培养后期尤为明显,表现为细胞体积增大,细胞形态从扁平宽梭形或不规则三角形到充满脂滴的椭圆形或圆形。试验得到的脂肪细胞经生长曲线测定、传代培养和油红O染色证明所分离到的细胞是具有典型特征的前体脂肪细胞,符合Van RLR提出的3个标准,即:来自脂肪组织,形态为梭形,胞浆内无或很少有脂肪颗粒;增殖迅速,与来自同一个体的成纤维细胞在倍增时间上接近;在形成单层汇合后能变为脂肪细胞,胞浆内出现许多脂肪颗粒。本试验初步确立了草鱼脂肪细胞离体培养的较为适宜的培养条件,为今后草鱼及其它鱼类的细胞离体培养以及相应细胞系的建立奠定了实验基础,对以鱼为实验动物研究脂肪生成及调控具有特殊意义。