bFGF对子痫前期患者内皮细胞ICAM-1表达影响的实验研究

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目的本实验通过研究子痫前期患者血清诱导培养的人类脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞间粘附分子—1(ICAM-1)的表达及外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对其的影响,探讨bFGF对内皮细胞损伤的保护作用,以期为妊娠期高血压疾病的治疗提供新的途径。材料与方法一、研究对象随机选择在2006年1月-2006年8月于我院分娩的重度子痫前期单胎妊娠患者(按照乐杰主编《妇产科学》第6版子痫前期诊断标准选择病例)共15例,随机选择同期无妊娠合并症及并发症的单胎正常妊娠孕妇15例作对照组。两组孕妇的年龄及孕周差异无显著性。所有研究对象均于入院后未经任何治疗,抽取空腹时肘前静脉血10ml,并3000r/min离心15min后取上清,—80℃冰箱保存待用。二、实验分组正常妊娠培养基(对照组)子痫前期血清条件培养基(PE组)含bFGF10ng/ml的子痫前期血清条件培养基(PE+b组)20%DMEM(含20%的小牛血清,蛋白浓度5mg/ml,余同无血清的DMEM,pH7.2)做为阴性对照。三、方法按常规方法培养血管内皮细胞株ECV-304,待细胞融合生长后,分别加入正常妊娠患者的血清(对照组)、子痫前期患者血清(PE组)、含bFGF10ng/ml及子痫前期患者血清的培养基(PE+b组),培养24小时(各15例,并设阴性对照组),分别应用细胞酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫细胞化学的方法比较各组表达的ICAM-1的水平。结果一、各组ECV-304表达ICAM-1细胞酶联免疫吸附试验结果PE组(OD值为0.2751±0.01831)较对照组(OD值为0.1845±0.00761)ICAM-1的表达明显增强,差异有统计学意义。PE+b组(OD值为0.1879±0.01058)较PE组ICAM-1的表达明显减少,差异有统计学意义。PE+b组较对照组ICAM-1的表达无明显差异。二、ECV-304表达ICAM-1免疫细胞化学染色结果定量结果显示,PE组ICAM-1的阳性细胞表达率(26.59±3.577)明显高于对照组(12.23±3.041),差异有统计学意义。与PE组比较,PE+b组ICAM-1的阳性细胞表达率(13.75±2.913)明显降低,差异有统计学意义。PE+b组较对照组ICAM-1的表达无明显差异。总之,ECV-304表达ICAM-1的水平,PE组较对照组明显增强;PE+b组较PE组明显下降;PE+b组较对照组无明显差异。结论综上所述本研究表明:一,子痫前期患者的血清可致培养的人脐静脉内皮细胞的ICAM-1表达增加,提示子痫前期患者血中可能存在某些因素刺激内皮细胞激活和损伤。二,外源性bFGF能抑制子痫前期患者血清刺激后血管内皮细胞的ICAM-1的表达,说明其对子痫前期患者血清刺激后引起的血管内皮细胞损伤有一定的保护作用,从而可能为今后妊娠期高血压疾病的治疗提供一个新的途径。
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