肝癌是消化系统常见的恶性肿瘤,尽管治疗手段多样,但总体而言预后仍较差。已有研究证实,乏氧微环境与与肝癌进展及预后差密切相关,而其中的调控机制尚未充分研究。乏氧可促进肿瘤细胞凋亡抵抗、侵袭转移等,而HIF-1α是乏氧时的关键调节因子。YAP是Hippo通路下游关键的效应因子,有研究表明YAP在乏氧时被激活,而YAP在乏氧微环境中对肝癌细胞的调控作用及机制尚不十分清楚。首先,通过免疫印迹实验,我们发现肝癌样本中除了高表达YAP,还高表达其旁系同源TAZ,而且二者具有表达不平衡性。对肝癌细胞进行敲减、过表达或加入抑制剂Verteporfin后,利用流式细胞术、免疫印迹,我们发现乏氧时只有同时敲减YAP和TAZ才能显著促进肝癌细胞发生凋亡;将Verteporfin给予荷瘤小鼠后通过小动物活体成像技术和免疫组化,我们证实了上述假说。其次,研究表明以YAP高表达为主并激活的肝癌恶性度更高。我们通过免疫荧光实验研究发现乏氧可以促进YAP入核激活并与HIF-1α核内共定位;通过肝癌患者免疫组化,我们进一步证实YAP和HIF-1α共定位于细胞核;利用内源性和外源性免疫共沉淀,我们发现激活的YAP可与HIF-1α相互作用;再次,利用过表达、敲减YAP的稳转细胞株,通过细胞迁移、侵袭实验和动物肝原位移植瘤、尾静脉注射实验,我们发现乏氧下YAP可促进肝癌细胞发生侵袭转移;最后,利用免疫印迹、CHX实验等发现,我们发现在乏氧条件下,YAP可稳定HIF-1α,减慢其蛋白酶体降解速率;利用敲减、过表达HIF-1α稳转细胞株,通过免疫印迹实验,我们发现乏氧下HIF-1α可促进肝癌细胞发生EMT。通过本研究我们证实,在乏氧微环境中,YAP与其旁系同源TAZ共同调节肝癌细胞凋亡;乏氧促进YAP入核并通过减慢蛋白酶体降解而稳定HIF-1α,后者介导EMT而促进肝癌细胞迁移和侵袭。