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绞股蓝Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)Makino为葫芦科Cucurbitaceae绞股蓝属Gynostemma多年生草质藤本植物,全草入药,绞股蓝皂苷为其主要有效成分。本实验在考察绞股蓝叶表皮微形态特征的基础上,研究不同产地绞股蓝中绞股蓝总皂苷和特征性成分绞股蓝皂苷A的含量,考察器官、品系和生长时期对皂苷含量的影响,以探讨叶形态与次生代谢物含量及环境的关系。1.绞股蓝叶片上、下表皮各为一层细胞,上表皮细胞为无规则型,具角质层,有毛状体,偶见腺毛,偶见气孔分布于主脉附近;下表皮具腺毛和气孔,偶有毛状体见于叶脉上;气孔器散生,气孔器长宽比为1.46~3.08,气孔指数为19~32,气孔密度为96~429个/mm2。2.建立了绞股蓝皂苷A的HPLP-ELSD检测法,并与HPLC-UV法进行对比,详细考察了供试品溶液制备、流动相选择、洗脱条件、雾化温度、氮气气压等影响因素,该方法简便、可靠。采用正交试验分别优化绞股蓝总皂苷和绞股蓝皂苷A的超声波提取条件,提取溶剂和溶剂用量对总皂苷提取效果影响显著;提取溶剂浓度对绞股蓝皂苷A提取效果影响显著。3.考察了绞股蓝不同部位、品系和生长时期对总皂苷和绞股蓝皂苷A含量的影响。绞股蓝的根及根茎中所含皂苷类物质的种类最多,总皂苷和绞股蓝皂苷A的含量均为叶片>根及根茎>茎>果实>种子。品系对绞股蓝皂苷的含量影响显著,不同生长时期绞股蓝总皂苷和绞股蓝皂苷A的含量不同,但总皂苷和绞股蓝皂苷A的积累变化趋势相同,均为花果期较高。4.收集了中国8个省51份绞股蓝材料,对其皂苷含量进行分析。不同产地绞股蓝总皂苷和绞股蓝皂苷A含量缺少相关性,揭示不同地区绞股蓝总皂苷类单体的种类和含量可能存在差异。绞股蓝总皂苷含量以湖北和陕西较高,各地差异显著。陕西平利栽培品种PL.1和PL.2在所考察样本中总皂苷含量最高,应推广该品系及种植经验。口味为淡味的绞股蓝比苦味、甜味和苦甜味的绞股蓝的总皂苷含量少。绞股蓝叶片复叶小叶数目与总皂苷含量没有相关性。5.绞股蓝在自然和栽培状态下,叶形态、生长状况、皂苷含量等方面均存在较大差异,体现了绞股蓝丰富的遗传多样性,也是其生长繁衍的重要基础。我们尝试探讨了绞股蓝叶表微形态与皂苷含量及环境因子的关系,还应综合考察光、温、水、气、营养等多种环境因子,有待深入研究其机制。