赤芍为我国的传统中药材,是毛茛科植物芍药Paeonia laetinora Pall.或川赤芍Paeonia veitchii Lynch.的干燥根,始记载于《本经》,味苦,性微寒,归肝经。据《中国药典》（2015年版一部）记录,赤芍具有清热凉血,散瘀止痛的功效,可用于温毒发斑,跌扑损伤,肝郁肋痛,经闭痛经和臃肿疮疡等症。赤芍中的化学成分较复杂,但赤芍中的单萜苷类成分被认为是赤芍的主要活性成分,主要有芍药苷、芍药内酯苷、氧化芍药苷、苯甲酰羟基芍药苷、苯甲酰芍药苷等,总称为赤芍总苷,其大部分具有桥头氧β-葡萄糖和高度氧化的笼状蒎烷骨架结构,研究表明这些单萜苷类成分对血液系统、神经系统和消化系统等具有很强的药理功效。现代药理学表明,芍药苷具有神经保护、降血糖、免疫调节、抗关节炎、肝损伤保护和抗肝纤维化等多种作用。本研究以赤芍的单萜苷类成分为研究对象,对其进行提取分离,并对芍药苷进行体外代谢（肠内菌转化和肝微粒体转化）研究。第一部分为单萜类化学成分的提取、分离、纯化和结构鉴定。首先,通过热回流的方式对赤芍进行提取,赤芍提取液分别用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取,浓缩成三种提取浸膏,将所得的浸膏经薄层层析法、硅胶柱层析、中压制备液相等分离手段,最终得到了四种单萜苷类化合物以及一种其他类化合物,通过对其理化性质及光谱分析,鉴定其分别为芍药苷、芍药内酯苷、氧化芍药苷、芍药新苷和苯甲酸,质量分别13.78g,121mg,75mg、80mg、91mg,纯度均高于95%,为后期药物代谢研究做准备。第二部分为对芍药苷的体外肠内菌转化和肝微粒体的代谢研究。芍药苷的肠内菌转化。体外从健康成人粪便中制备肠内全菌株,置于在培养基中,并加入一定浓度的芍药苷,在厌氧培养箱中活化培养,于37℃条件下振摇,分别培养2、4、8、12、18,24,30,36和48h,反应结束后使用有机试剂终止反应,并萃取,萃取液浓缩得到的残渣用甲醇复溶,过膜后,高效液相和液质联用仪检测。采用HPLC-ELSD检测不同转化时间条件下芍药苷的剩余量,结果发现,芍药苷在转化12h时已经基本转化完全,并且在色谱图上,能明显看出实验组较对照组新增加的色谱峰。采用HPLC-MS/MS对转化产物进行检测,通过相关代谢软件对数据进行分析,共发现34个代谢物,初步鉴定了 10个可能的代谢产物,其中,7个代谢物为首次在该体系中发现。芍药苷的肝微粒体转化。从大鼠肝脏中制备得到肝微粒体,采用Lowry法测定大鼠肝微粒体蛋白浓度,计算得浓度为25.88mg·ml-1。以大鼠肝微粒体为代谢模型,并辅以各种辅酶,包括NADP、NADH、G-6-P、G-6-PDH以及MgCl2,在37℃的恒温条件下,对芍药苷进行培养,采用HPLC-DAD作为检测手段,通过芍药苷在肝微粒体温孵培养后的剩余量为指标,对肝微粒体和辅酶的浓度进行优化实验,结果显示,最佳的转化体系为肝微粒体浓度为 2mg/L,NADP 的浓度为 1mmol/L,NADH 的浓度为 0.5mmol/L,G-6-P的浓度为 1 0mmol/mL,G-6-PDH 的浓度为 1.0IU/mL,Mg2+的浓度为 4.0mmol/L,芍药苷的浓度为0.1mg/mL。选择转化率最高的样品,对其进行液质检测,通过相关代谢软件和相关知识对数据进行分析共发现23个代谢物,初步鉴定了 5个可能的代谢产物,5个化合物首次从该体系发现。芍药苷在肠内菌和肝微粒体代谢中多发生水解、氧化和开环等反应。这对芍药苷的体内代谢研究具有重要的意义,有助于推测其代谢的机理和相关酶,为开发出疗效好、毒副作用低的新药提供依据。