疮疡消炎软膏是由紫草提取物和大黄提取物等制成的天然药物外用制剂,主要用于皮肤表皮损伤所致的创面糜烂、真菌感染、慢性皮肤溃疡等症状。按照国家食品药品监督管理局颁布的《药品注册管理办法》中中药、天然药物第六类新药研究的技术指导原则,运用现代制药技术,对该制剂进行了临床前药学部分的试验研究,具体内容包括以下几个部分。1药材提取物的研究1.1紫草总萘醌的提取分离工艺和提取物质量标准研究本试验对传统溶剂提取法和新技术CO₂超临界流体萃取法进行比较研究,由于CO₂超临界流体萃取法具有提取物纯度高、提取效果好,且萃取物中无有机溶剂残留等优点,可提高本制剂疗效,同时对疮疡面无刺激性,符合本制剂所治疗病症需求。另外,紫草中总萘醌类成分具有热不稳定性,当温度超过60℃时其含量明显下降,而CO₂超临界流体萃取法具有操作温度低、成分不被破坏等优点。综上,最终确定采用CO₂超临界流体萃取法提取分离紫草中有效成分总萘醌。运用正交试验法,对萃取温度、萃取压力和萃取时间进行优选,以总萘醌中有效成分β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁为考察指标,采用高效液相色谱法测定提取物的含量,确定了紫草总萘醌的最佳提取工艺:萃取温度为40℃、萃取压力为30MPa、萃取时间为120分钟。参照《中华人民共和国药典》2010年版一部药典中药材提取物的相关检查项,建立了紫草总萘醌的质量标准,包括性状、干燥失重、炽灼残渣、重金属等项,通过薄层色谱法对其进行定性分析,采用高效液相色谱法对其进行定量分析,并制定了各项检查的限度。结果表明采用此工艺萃取物纯度高、杂质少,且具有低温、无毒、节能环保等优点,适合推广与放大生产。1.2大黄总蒽醌的提取分离工艺和提取物质量标准研究本试验采用高浓度乙醇提取,酸碱法分离大黄总蒽醌类成分,再用大孔吸附树脂进行纯化,先运用单因素试验法,对药材粒度、提取方法和提取溶剂进行初步考察;再运用正交试验法,对溶剂量、提取次数和提取时间进行优选,确定大黄总蒽醌的最佳提取工艺:简单回流法、药材粒度过60目筛、提取溶剂为70%乙醇、单次溶剂量为8倍药材重量、提取时间为1小时、提取次数为3次。综合运用大孔吸附树脂法和酸碱法分离纯化大黄中总蒽醌成分,确定工艺参数:洗脱液为75%乙醇溶液,加盐酸调pH值为1.0。参照《中华人民共和国药典》2010年版一部药典中药材提取物的相关检查项,建立了大黄总蒽醌的质量标准,包括性状、干燥失重、总灰分等项,通过薄层色谱法对其进行定性分析,采用紫外分光光度法对其进行定量分析,并制定了各项检查的限度。结果表明采用此工艺提取率高,提取物纯度好,适合于工业化生产。2疮疡消炎软膏的制剂研究筛选常用的软膏基质、丙二醇、乳化剂、液体石蜡、羊毛脂以及防腐剂等辅料,以软膏剂的外观性状、涂展性和稠度等为考察指标,通过透皮吸收累积渗透量筛选促进吸收剂及其用量,初步确定辅料的种类、用量范围。采用Box-Behnken响应面设计对软膏处方中硬脂酸、丙二醇和月桂氮卓酮用量的配比进行优化。以紫草总萘醌中有效成分β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁8小时透皮吸收累积渗透量为考察指标,运用Design Expert 7.1.6软件对试验数据进行多元回归拟合,得出多元回归模型,根据数学模型描绘响应面图,得出最佳处方工艺参数:硬脂酸的用量为29.03%,丙二醇的用量为6.88%,月桂氮卓酮的用量为2.73%。考虑工业化生产的可行性,故确定硬脂酸的用量为29%,丙二醇的用量为7%,月桂氮卓酮的用量为3%。最终确定制剂工艺:硬脂酸、羊毛脂、液体石蜡作为油相,50℃水浴加热使溶解;将丙二醇、月桂氮卓酮、三乙醇胺、尼泊金乙酯溶解在水中作为水相,水浴加热至同样温度,将二者混合搅拌至冷凝,分装即得。3过敏性和溶血试验研究本试验观察家兔皮肤的过敏性反应,以红斑、水肿的轻重作为考察指标,对疮疡消炎软膏进行过敏性试验研究,结果表明:疮疡消炎软膏经多次涂抹给药,与阳性药2,4-二硝基氯代苯丙酮液做对照,家兔未见皮肤过敏现象,表明本制剂无明显的过敏性反应。运用观察法和紫外分光光度法监测疮疡消炎软膏对家兔血液中红血球的溶血情况,以蒸馏水作为阳性对照,计算得出制剂的溶血率。结果表明:本制剂溶血率小于5%,无明显溶血现象,表明本制剂是安全的,为进一步研究奠定了基础。4制剂质量标准研究在制剂处方、制备工艺稳定的前提下建立了疮疡消炎软膏的质量标准,包括性状、鉴别、检查（粒度、装量、pH值、无菌、微生物限度）、含量测定等。能够反映和控制本制剂的质量。通过上述对疮疡消炎软膏临床前药学部分的试验研究,得到了制剂工艺稳定、无过敏性和溶血性、质量可控的疮疡消炎软膏,为进一步的药效学和临床研究奠定了基础。