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目的:本研究通过观察补肾中药复方对控制性超促排卵小鼠围着床期子宫内膜厚度、形态学及MVD、VEGF、Ang-2蛋白表达及妊娠率的影响,以探讨补肾中药复方改善子宫内膜容受性的部分机制,为临床治疗提供科学的理论依据。 方法:SPF级160只健康雌性未孕小鼠,适应性喂养7天后行阴道脱落细胞检查,连续观察两个周期,选择动情周期正常的150只小鼠为实验研究对象。随机分为5组,每组30只,分别为对照组、模型组、补肾中药复方低、中、高剂量组。除对照组外,各组建立控制性超促排卵小鼠模型。补肾中药复方低、中、高剂量组分别从造模第1天开始灌服不同浓度补肾中药,模型组和对照组给予同等剂量生理盐水灌胃,连续11天。对照组于动情期,模型组、补肾中药复方低、中、高剂量组于注射HCG日,按雌雄2∶1比例合笼饲养。次日晨见阴栓记为妊娠第1天,统计妊娠数,计算妊娠率,各组孕鼠分别于孕第2、3、4天取材,通过采用HE染色观察小鼠子宫内膜厚度及形态学变化;免疫组化法检测小鼠子宫内膜MVD、VEGF、Ang-2蛋白表达的变化。 结果:(1)各组小鼠妊娠率比较:与对照组比较,模型组小鼠妊娠率下降,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,补肾中药复方各剂量组妊娠率均提高,差异有统计学意义,低剂量组P<0.05,中、高剂量组P<0.05;补肾中药复方中、高剂量组与低剂量组小鼠妊娠率相比,差异有统计学意义(P<0.05);高剂量组较中剂量组妊娠率增加,差异无统计学意义(P>0.05);中、高剂量组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)围着床期各组小鼠子宫内膜厚度比较:各组小鼠随着受孕日数的增长,子宫内膜越来越厚。与对照组比较,模型组小鼠孕第2,3,4天子宫内膜厚度均明显降低,差异有统计学意义(均P<0.05);与模型组比较,补肾中药复方各剂量组孕第2,3,4天子宫内膜厚度均显著增加,差异有统计学意义(均P<0.05);补肾中药复方中、高剂量组与低剂量组小鼠孕第2,3,4天子宫内膜厚度相比,差异均有统计学意义(P<0.05);而中、高剂量两组比较,差异无统计学意义(P>0.05);中、高剂量组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)围着床期各组小鼠子宫内膜形态学变化:对照组:随着妊娠天数的增加小鼠子宫内膜逐渐增厚,腺体数量变多,腺腔变大、弯曲,腺腔分泌物增多;间质疏松水肿,基质细胞增大,在着床期(孕第4天)后腺腔逐渐闭合,基质细胞增殖分化成蜕膜细胞。模型组:与对照组孕第2-4天相比,子宫内膜发育滞后,内膜较薄且发育不良;腺体少而小,腺腔扩张不明显,分泌物较少;部分间质密,部分疏松;部分小鼠腺体、间质生长不同步,间质在分泌期,腺体在增生期。补肾中药复方各剂量组与模型组相比,有明显的改善,与对照组接近。各剂量组比较无明显差异。(4)免疫组化法检测MVD、VEGF、Ang-2蛋白表达的变化:与对照组孕第2,3,4天相比,模型组MVD、VEGF、Ang-2都明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组孕第2,3,4天比较,补肾中药复方各剂量组MVD、VEGF、Ang-2都显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组孕第2,3,4天比较,补肾中药复方各剂量组MVD、VEGF、Ang-2表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);补肾中药复方中、高剂量组与低剂量组小鼠孕第2,3,4天MVD、VEGF、Ang-2表达相比,差异均有统计学意义(P<0.05);而中、高剂量两组无差异(P>0.05)。 结论:1.控制性超促排卵可能通过影响围着床期小鼠子宫内膜形态,减少MVD、VEGF、Ang-2的表达,影响子宫内膜血管生成,降低子宫内膜容受性,导致小鼠妊娠率降低。2.补肾中药复方可能通过改善围着床期小鼠子宫内膜形态,增加MVD、VEGF、Ang-2表达,促进子宫内膜血管生成,改善子宫内膜容受性,从而提高小鼠妊娠率。