本论文以褐菖鲉(Sebastiscus marmoratus)血清CRP作为实验的研究对象，选择了两种目前颇为关注的海洋环境污染物四溴双酚A(TBBPA)和三丁基锡(TBT)为污染材料，研究褐菖鲉血清C—反应蛋白(C—reactive Protein)的基本性质以及在TBBPA和TBT暴露下的免疫反应特征。实验分别以0.2mg/L的TBBPA和0.2μg Sn/L的TBT为实验的暴露浓度，以7个时间梯度(0，3，6，12，24，36，48h)取样，通过亲和层析纯化法、紫外吸收定量法、未变性电泳法(Native—PAGE)、SDS—PAGE电泳法以及酶联免疫法(ELISA)等检测手段，探索了褐菖鲉血清CRP的结构性质，系统分析了这种蛋白在环境污染物TBBPA和TBT胁迫下其含量水平、分子形态、分子性质、表面抗原物质所产生的变化，并探讨了这些变化的分子内部行为机制。结果表明： 1．运用亲和层析法提纯和紫外吸收定量法得出正常褐菖鲉血清中的CRP含量为378.515±13.51μg/mL；SDS—PAGE和PAS染色法分析发现该蛋白为糖蛋白，只含有一种亚基，大小约为24.5kDa；表明褐菖鲉和其它绝大部分鱼类一样， CRP中只含有一类为糖蛋白的亚基。 2．TBBPA和TBT暴露处理发现，褐菖鲉血清CRP的浓度都随着时间逐渐增高，并且在12h时达到峰值，暴露于TBBPA的CRP最大值为常量的2.079倍，且暴露于TBT的CRP则为常量的2.748倍；随后，血清CRP的浓度开始下降，到48h时已降到常量水平甚至略低于常量值，这一结果说明了TBBPA和TBT的暴露引起了褐菖鲉CRP含量发生变化，而变化程度的不同则表明TBT对褐菖鲉可能具有更强的毒性作用。 3．经7.5％未变性电泳(Native—PAGE)检测发现，未处理的CRPN和经过污染物诱导产生的峰值处的CRPs蛋白条带较为单一，但是各具不同的蛋白质迁移率，一方面表明所提取的CRPs纯度较纯，另一方面可以认为不同污染物的诱导造成相应CRPs分子的分子量、电荷和(或)结构发生了变化。 4．从TBBPA和TBT暴露下褐菖鲉血清CR2动力学模式上看，CKP经两种污染物诱导，蛋白质条带随暴露时间经由单一→两条→单一→两条→单一→单一的变化过程。说明TBBPA和TBT诱导产生了新的CRP形式，而且在暴露于污染物的过程中，CRP以常态和诱导态并存。尤其是TBT暴露下CRP诱导态存在时间更长，该现象进一步证明TBT对褐菖鲉CRP具有更强的诱导性。 5．SDS—PAGE(12％)检测了CRPN以及经TBBPA和TBT诱导的峰值部分的CRPTBBPA和CRPTBT发现，三种蛋白均有条带出现在相同的位置，但经过污染暴露的诱导态CRPs在电泳中还出现了其他条带，说明CRPs中的亚基已经产生了不同的变化；以10％SDS—PAGE和15％SDS—PAGE检测CRPs均得到同样的结果。Schiff试剂对这三种蛋白染色仍然均呈阳性反应，表明CRP不但在亚分子水平上发生了变化，而且这些变化可能与其蛋白结构中的碳水化合物的组成有关。 6．通过ELISA法观察了CRPN与诱导态CRPTBBPA和CRPTBT的表面抗原性质发现，CRPTBBPA和CRPTBT与兔抗褐菖鲉CRPN血清反应作用强烈，但反应程度有差别。表明褐菖鲉经TBBPA和TBT暴露后，尽管三种CRPs均有相似性，但是与抗体结合的亲和性却有明显的变化，他们结合的顺序依次为CRPN＞CRPTBBPA＞CRPTBT。从而进一步说明TBBPA和TBT污染胁迫已经引起了CRP表面抗原物质的变化，而这些变化可能与褐菖鲉的血清CRP在免疫早期的解毒机制有着密切的关系。 7．将去糖基化的CRPs进行未变性电泳检测发现，常态的CRPN和诱导态的CRPs迁移位置相同，从而证实了碳水化合物是造成CRP变化的主要原因。 8．CRPs浓度的变化与形态的转化有关联，在CRPs形态转化的过程中，由于常态CRPs的转化和机体自身生成诱导态的CRPs使诱导态CRPs浓度逐渐升高；另一方面，浓度的升高也可以反应出CRPs形态的变化。 9．CRPs的浓度、形态以及与抗体亲和性的改变与污染物的种类有关，这些参数的变化情况可以反应污染物毒性的大小。 综上所述，TBBPA和TBT暴露能在短时间内诱导褐菖鲉血清C—反应蛋白(CRP)含量上升，造成相应CRPs分子的分子量、电荷和(或)结构的变化。在TBBPA和TBT暴露过程中，CRP分子存在着动力学的诱导模式，并以常态和诱导态并存。其中以TBT的诱导能力为更强。CRP分子性质的改变暗示着TBBPA和TBT污染胁迫引起其蛋白结构中碳水化合物组成发生改变；同时造成CRP表面抗原物质的变化。如果能够获得针对这些特异性有害物质诱导的CRPs抗原决定基的单克隆抗体(Mabs)，就能够在CRP的微观异质性水平上识别CRP，还可以用来识别有害物质。以上结果表明，在污染胁迫下，褐菖鲉机体内正常的生理机能受到了影响，CRP作为鱼类机体免疫分子中免疫应急机制的调动，对机体损伤的修复与免疫早期的解毒起了重要的作用。该研究可为我国海洋污染的监测和污染早期预警提供理论依据，特别是对海洋环境污染短期暴露或污染突发事件监测提供宝贵资料。