在前期对花生测序品种GT-C20的抗黄曲霉基因芯片筛选中,鉴定出了可表达活性AhPR-1蛋白的AhPR-1基因序列,AhPR-1基因是在花生中首次确定的几个重要抗性基因之一。本文以AhPR-1基因为基础,研究了 AhPR-1蛋白在花生上的抗真菌活性,优化出了影响抑制效果的三个因素;进一步试验构建了用于农杆菌介导的pCAMBIA1300改-AhPR1载体,并探索了供试花生品系阜花11的再生体系。本文的第一部分基于大肠杆菌重组花生AhPR-1蛋白(pathogenesis-related protein)具有抑菌的作用功能,利用响应面法优化蛋白抑制黄曲霉菌在花生上生长的条件因素。以表观评价法测评的黄曲霉生长程度和HPLC法检测的毒素合成的含量为评价标准,考察了 AhPR-1蛋白浓度、作用温度和水分活度对蛋白抑制黄曲霉菌侵染花生及黄曲霉毒素产生的影响。结果显示,在花生染黄曲霉菌浓度为4×106 CFU/mL条件下,随着蛋白浓度升高抑菌效果越明显,0.32ng/μL和0.40ng/μL,差别不是很明显;温度28℃,水分活度0.3-0.4的条件下,AhPR-1蛋白的抑制效果最显著。因此,在一定的环境条件下,AhPR-1蛋白能够一定程度上抑制黄曲霉菌在花生表面的繁殖生长和毒素的合成。第二部分为农杆菌介导质粒的构建,目的是建立插入AhPR-1基因的转化质粒,以辽宁省农科院改造的pCAMBIA1300改质粒为骨架载体,构建pCAMBIA1300改-AhPR1载体。成功构建的农杆菌载体为进一步的植物转基因试验奠定一定基础。第三部分为转基因AhPR-1花生再生体系建立条件的探索。本试验以阜花1 1品系为供试花生品系,以胚轴为外植体,建立其高效再生体系,确定了该品系高再生率的最佳培养基组合,即:种子萌发培养基MS+0.7%琼脂;脱分化培养基 MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L+0.7%琼脂;继代培养基 MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L+0.7%琼脂;生根培养基 1/2 MS+NAA 1.0 mg/L+0.7%琼脂。为以农杆菌介导的AhPR-1基因的转基因植株的获得提供参考。