研究背景和目的：　　白介素1受体Ⅰ型（IL-1 receptor type1,IL-1RⅠ）是IL-1功能受体，对多种免疫细胞的分化、生长、活化和增殖有重要的调节作用，并参与造血、压力反应及神经内分泌等多种生理过程。深入研究 IL-1RⅠ有助于炎症疾病的发病机制探讨和辅助诊断。　　生物体天然表达的IL-1RⅠ量都比较低，从中提取蛋白质进行结构、功能研究或临床应用难度大。本实验就利用毕赤酵母表达系统进行体外蛋白表达。毕赤酵母接近高等真核细胞，不含内毒素和其他有害物质，使用安全；繁殖速度快，对培养条件要求低，培养基价廉，生产成本低；在毕赤酵母中表达的蛋白既可存在于胞内，又可在分泌信号作用下将蛋白分泌至胞外；具有强有力的易控制的醇氧化酶基因外源基因启动子，可对外源蛋白的表达进行严格调控；可对表达的外源蛋白进行翻译后的加工和修饰，从而使目的蛋白具有所应有的生物学活性。　　因此，本课题用毕赤酵母表达技术，表达 IL-1RⅠ蛋白，为其功能研究或抗体制备提供物质基础。　　方法：　　第一部分：人IL-1RⅠ胞外区基因克隆及其pPICZαA-sIL1RⅠ表达载体的构建。运用Trizol一步法提取人白细胞RNA；采用RT-PCR扩增IL-1RⅠ胞外区基因（sIL-1RⅠ），经双酶切连接构建重组质粒pPICZαA-sIL1RⅠ后转化大肠杆菌stb13。PCR鉴定阳性克隆，并外送测序。　　第二部分：pPICZαA-sIL1RⅠ在毕赤酵母的表达。SacⅠ内切酶线性化pPICZαA-sIL1RⅠ重组表达载体；线性化质粒经电转仪转化 GS115。PCR对阳性克隆进行鉴定，以及对GS115转化子表型筛选。确定表型后，对重组菌株进行甲醇诱导蛋白表达。提取菌体蛋白和上清液进行 western blot检测以鉴定蛋白表达属于菌内表达还是分泌表达。　　结果：　　第一部分：扩增的IL-1RⅠ胞外区基因约为1000bp；阳性克隆经PCR鉴定目的基因插入载体pPICZαA；基因测序结果经BLAST比对后显示基因长1008bp，碱基与IL-1RⅠ读码框编码区一一对应，提示插入片段正确。　　第二部分：pPICZαA-sIL1RⅠ重组载体线性化经电转仪成功转化酵母菌株GS115；转化子表型筛选结果为甲醇诱导缓慢型 Muts；对培养上清和菌体蛋白进行 Western-Blot检测结果：上清没有检测到蛋白，在菌体内检测到蛋白。　　结论：　　成功构建pPICZαA-sIL1RⅠ重组载体；pPICZαA-sIL1RⅠ成功转入酵母菌GS115；Western-Blot结果显示酵母经甲醇诱导表达出约39kDa的蛋白；sIL-1RⅠ蛋白为菌体内表达。