球孢白僵菌与印楝素对温室白粉虱实验种群影响研究

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温室白粉虱(Trialeurodes vaporariorum Westwood)是一种世界性农业害虫,具有分布广、寄主多的特点,目前生产上主要依靠使用化学农药控制其发生与危害。由于化学药剂的大量使用,以及温室白粉虱发育期短、繁殖力强的生态对策,导致其抗药性急剧上升。应用生物防治手段不但可以延缓害虫抗性增长,还具有环境友好、持续控制等优势,合理开发使用生防技术越来受到关注。因此,本研究开展生防真菌球孢白僵菌(Beauveria bassiana)和印楝素对温室白粉虱的致病力测定,评价两者混配对其发育、繁殖与存活的影响,并利用扫描电镜技术比较分析了球孢白僵菌对单独使用和混配使用下对温室白粉虱若虫的侵染过程。主要研究内容如下:1.球孢白僵菌株系筛选及其对温室白粉虱发育与存活的影响测定了8株供试球孢白僵菌株系对温室白粉虱3龄若虫致病效果,在初步筛选过程中,所有株系均表现出一定的致病力,在孢子悬浮液浓度为1×107个/mL时,校正死亡率为27.0%~70.6%,僵虫率为27.0%~67.5%,同时在上述浓度下进行时间-死亡率线性拟合测得致死中时间为4.9~7.9 d,Bb252株系的校正死亡率、僵虫率显著高于其他株系,因此判定Bb252是对温室白粉虱具有潜在控制作用的优良株系。进一步测定Bb252株系对温室白粉虱的致病力效果,测得LC50值为3.99×106个/mL。球孢白僵菌Bb252株系对温室白粉虱的潜在防控结果表明,1×104、1×105、1×106、1×107、1×108个/mL浓度Bb252孢子悬浮液处理温室白粉虱24 h后,各浓度处理对其取食、产卵行为均有显著影响,且随着浓度的升高而增强,在1×108个/mL浓度下,球孢白僵菌Bb252株系对温室白粉虱的取食忌避率、拒食率、产卵忌避率最高,分别达到78.8%、80.9%、78.7%。温室白粉虱发育历期随着球孢白僵菌Bb252浓度增加而逐渐缩短,在1×108个/mL浓度下,发育历期最短,为20.73±0.30 d,显著低于对照处理下的23.48±0.23 d。利用Kaplan-Meier法分析结果表明在浓度为1×108个/mL作用下,温室白粉虱累积存活率在22 d达到最低值0.482。2.印楝素对温室白粉虱存活与发育的影响测定不同浓度印楝素对温室白粉虱3龄若虫的毒力作用,结果表明印楝素对温室白粉虱3龄若虫的LC50为5.76 mg/L。通过忌避作用、发育历期影响以及生存分析,印楝素在500 mg/L、50 mg/L、5 mg/L、1 mg/L、0.5 mg/L等5种浓度处理24 h后,温室白粉虱拒食率为17.81%~60.11%,产卵忌避率为14.58%~69.64%,且随着浓度的增高忌避作用越明显。经印楝素处理后,烟草叶片不仅可以降低温室白粉虱种群的取食率,取食该叶片后还可导致粉虱发育历期延长,当浓度达到50mg/L时,其发育历期最长为24.95±0.83 d。温室白粉虱在50 mg/L浓度印楝素处理下累计存活率在25 d达到最低值0.432。因此,印楝素对粉虱种群控制作用除直接的致死效应外还具有趋避、拒食以及干扰其生长发育等潜在控制作用。3.球孢白僵菌与印楝素混配使用对温室白粉虱防控效果分析通过球孢白僵菌与印楝素二者的相容性混配试验,利用不同浓度印楝素配制成含毒培养基并接种白僵菌菌饼,结果表明,印楝素浓度在500 mg/L时,对球孢白僵菌的抑制率达到65.3%,当印楝素浓度低于50 mg/L,对其抑制率均小于30%,表明两者相容较好。将印楝素与球孢白僵菌分别以LC50浓度按9∶1、4∶1、1∶1、1∶4、1∶9的比例混配,在1∶1、1∶4比例混配后表现为增效作用,其中1∶4比例下的共毒系数最高为294.23。通过扫描电镜观察单剂与最优混剂中球孢白僵菌孢子萌发及侵染过程,发现白僵菌孢子易在寄主表皮的凹槽、褶皱处附着、萌发,在光滑的背板处则极易脱落。2种剂型对孢子萌发影响差别不大,在48 h内均能够陆续萌发,只有在菌丝营养生长后期,形成网状结构包围寄主时(96 h~120 h),混剂菌丝的网状结构较单剂的稀疏。
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