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禽大肠杆菌病表现为心包炎、肝周炎、气囊炎等病变,在养殖业造成感染鸡死亡率、种蛋孵化率低等问题。以实验室研制的禽致病性大肠杆菌E516ΔlpxL Δ lpxM(O1)、E058△lpxL △ lpxM(O2)、E522 pxL △ lpxM(O78)三株变株,制备成Montanide TSA 71 VG油佐剂三价灭活疫苗,并对其疫苗保存期和被动免疫效力进行研究,现将研究结果报告如下:1、疫苗保存期:对实验室制备的E516 Δ lpxL Δ lpxM(O1)、E058 Δ lpxL Δ lpxM(02)、E522 △lpxL Δ lpxM(078)MontanideTSA71VG油佐剂三价灭活疫苗,进行保存期实验,研究其保存9个月和12个月时的安全性和免疫保护效力。结果显示,保存9个月和12个月的疫苗免疫鸡,观察7 d,疫苗免疫组实验鸡与健康对照组比较,只有免疫1mL/羽的试验鸡注射后精神状态差,食欲下降,24小时内恢复,注射部位出现0.1 cm～1.2 cm大小不等的结节,但未出现全身不良反应,免疫1周后注射部位结节消失,且平均日增重与健康对照组无显著性差异,说明疫苗保存9和12个月后,仍然具有良好的安全性。免疫效力实验中,无特定病原体(specific pathogen free,SPF)鸡14日龄时进行免疫,35日龄时进行攻毒,免疫后每周采集所有鸡的血清,用禽大肠杆菌血清02型E058株、01型E516株、078型E522株的脂多糖分别致敏红细胞,通过间接血凝方法,对保存9个月和保存12个月疫苗的免疫鸡进行血清抗体效价测定。结果表明,疫苗保存9个月和12个月后,其血清学效力检验结果与新制疫苗无显著差异。攻毒对照组90%及以上的试验鸡死亡。疫苗在2～8℃C保存9个月后其免疫组试验鸡仍可达到60%以上免疫保护,其中对E516具有70%保护率,对E058具有66.67%的保护率,对E522有88.89%的保护率,其中虽有个别试验鸡出现精神萎靡,食欲、饮水降低,但并未死亡。疫苗保存12个月,其免疫组对E516有70%的免疫保护率,对E058有77.78%的保护率,对E522有88.89%的免疫保护率。上述结果表明本疫苗2～8℃保存6个月和12个月以后免疫效力均未明显改变。2、被动免疫试验:对120日龄SPF母鸡进行免疫,0.5 mL/羽;免疫后0.5、1、2、3个月采集母鸡血清,同时,收集母鸡免疫后0.5、1、2、3个月的种蛋孵化。对孵出的雏鸡在7、14日龄时进行采血、抗体测定,同时进行攻毒。结果显示母鸡免疫之前无抗体,母鸡免疫0.5个月后抗体水平在1:8～1:32之间,免疫后1～2个月期间LPS抗体达到1:32～1:128,免疫后3个月LPS抗体稍降至1:16～1:64之间。免疫后0.5个月的母鸡收集的种蛋,孵出雏鸡在7日龄时抗体水平在在1:2～1:16之间,14日龄雏鸡抗体水平在0～1:8之间。免疫后3个月的母鸡收集种蛋,种蛋孵出的7日龄雏鸡抗体水平在1:8～1:32之间,14日龄雏鸡抗体水平在1:4～1:16之间。而免疫母鸡1、2个月后收集种蛋孵出的雏鸡,这2个时间段孵出的7日龄雏鸡抗体水平均在1:16～1:64之间,14日龄雏鸡抗体水平均在1:8～1:32之间。母鸡免疫后0.5、3个月收集种蛋孵出雏鸡攻毒后不能完全保护,0.5个月母鸡种蛋孵出的7日龄雏鸡免疫组攻毒后保护率在12.5%～14.3%之间;14日龄免疫组攻毒后保护率在12.5%～22%之间。免疫后3个月母鸡,种蛋孵出的7日龄免疫组攻毒后保护率在12.5%～22%之间;14日龄雏鸡免疫组攻毒后保护率在37.5%～50%之间。免疫母鸡1、2个月收集种蛋孵出雏鸡攻毒后能完全保护(这2个时间段母鸡抗体均在1:32～1:128之间);种蛋孵出的7日龄雏鸡免疫组攻毒后保护率在在55.56%～88.89%之间;14日龄雏鸡免疫组攻毒后保护率在60%～88.89%之间;母源抗体达到1:32的雏鸡才能保护;低于1:32的雏鸡攻毒后多数不能保护。上述结果表明母源抗体的高低直接影响雏鸡的被动免疫效力,母鸡抗体水平与雏鸡免疫保护效力成正相关。免疫母鸡0.5、3个月收集种蛋孵出的7、14日龄雏鸡攻毒后不能完全保护,而母鸡免疫后1～2个月间收集种蛋孵出的7日龄雏鸡攻毒后能完全保护。因此,母鸡被动免疫持续期为免疫后的1～2个月。即使母鸡免疫后1～2个月间收集的种蛋孵出的14日龄雏鸡攻毒后也不能完全保护,因此雏鸡的初次免疫应在2周龄左右。