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目的:检测HuR(人类抗原R,Human Antigen R)、雄激素受体(Androgen Receptor,AR)蛋白在前列腺癌(Prostate Cancer,PCa)组织和前列腺细胞系中的表达;分析其表达与前列腺癌患者临床资料、病理的关系及与前列腺癌患者生存预后的相关性,及在前列腺细胞系中的表达差异。检测HuR蛋白抑制后AR蛋白在前列腺细胞系中的表达,及HuR蛋白抑制后对前列腺癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响;分析前列腺癌中HuR、AR蛋白两者之间可能存在的关系,及其在前列腺癌发生、进展中的作用和机制。方法:1.采用免疫组织化学方法检测HuR、AR蛋白在45例前列腺癌组织及20例良性前列腺增生组织中的表达及定位;统计分析前列腺癌组织中HuR、AR蛋白的表达与前列腺癌患者临床资料、病理的关系,以及与前列腺癌患者生存预后的相关性,并分析这两个蛋白表达之间的相关性。2.采用Western blotting方法检测HuR、AR蛋白在前列腺癌细胞系(LNCaP、PC3)及前列腺正常上皮细胞(RWPE-1)中的表达水平。3.采用Q-PCR检测HuR、AR在前列腺癌细胞系(LNCaP、PC3)及前列腺正常上皮细胞(RWPE-1)中mRNA的表达水平。4.建立稳定抑制HuR蛋白表达的前列腺癌细胞系(LNCaP、PC3)及前列腺正常上皮细胞(RWPE-1),检测HuR蛋白抑制后前列腺癌细胞中AR蛋白的表达;检测及分析HuR蛋白抑制后对前列腺癌细胞体外增殖、侵袭、迁移能力的影响。结果:1.免疫组织化学结果显示:HuR蛋白的阳性染色位于细胞核和细胞质;AR的阳性染色主要位于细胞核,少量胞浆着色。细胞核中HuR(N-HuR)的阳性表达率在前列腺癌癌组织为80.6%(29例/36例),良性前列腺增生组织为85%(17例/20例),表达差异无统计学意义(P>0.05);细胞质中HuR(CHuR)的阳性表达率在前列腺癌癌组织为63.9%(23例/36例),良性前列腺增生组织为20%(4例/20例),表达差异有统计学意义(P<0.05);AR蛋白在前列腺癌癌组织和良性前列腺增生组织标本中的阳性表达率分别是83.3%(30例/36例)和90%(18例/20例),差异无统计学意义(P>0.05)。2.HuR、AR蛋白表达与前列腺癌患者临床病例资料分析结果显示:肿瘤TNM分期、Gleason评分及病理分级与C-HuR的表达相关(P<0.05);AR的表达与Gleason评分有关(P<0.05),与TNM分期、病理分级无关(P>0.05)。而年龄、PSA与C-HuR、AR的表达均无相关性(P>0.05)。Kaplan-Meier结果显示C-HuR高表达组患者的五年生存率明显低于低表达组患者(P<0.05),而AR蛋白的表达与5年生存率无统计学意义(P<0.05)。3.Q-PCR结果显示:非雄激素依赖性前列腺癌细胞(PC3)中HuR、AR mRNA的表达高于雄激素依赖性前列腺癌细胞(LNCaP);而前列腺正常上皮细胞(RWPE-1)中HuR、AR mRNA的表达最低。Western blotting实验结果显示:AR和HuR蛋白的表达在前列腺激素非依赖性癌细胞PC3中表达水平最高;而前列腺正常上皮细胞RWPE-1中表达水平最底。AR和HuR蛋白在前列腺三种细胞系中的表达结果相一致。4.成功转染siHuR质粒,使HuR蛋白在前列腺三种细胞中表达明显降低;结果显示:在抑制HuR蛋白表达后AR蛋白的表达前列腺三种细胞中也明显降低;实验结果证明HuR与AR存在调控关系,HuR可以促进AR在前列腺细胞中的表达。5.Wound-healing、平板克隆、Transwell实验结果显示:HuR蛋白抑制后前列腺癌细胞体外增殖、侵袭、迁移能力明显减弱。结论:1.在前列腺癌细胞及组织中HuR、AR蛋白存在异常表达,可能参与调控了前列腺癌发生、发展的过程;2.前列腺癌中HuR、AR蛋白的表达与患者的临床病理,生存预后具有相关性,HuR、AR是前列腺癌患者生存预后的潜在分子标志物;3.HuR蛋白的抑制降低了前列腺癌细胞中AR蛋白的表达,HuR-AR存在调控关系;4.HuR蛋白的表达抑制降低了前列腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,可能为前列腺癌的治疗提供新的靶点。