挑选绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniane，下称MO)适宜的培养基，测出适宜于MO的培养温度、湿度、pH值以及最佳血清含量。同时研究其菌落菌体形态特征、生化特性、超微结构，并对河北省的邢台、保定、邯郸、廊坊四个地区部分羊场进行MO的流行病学调查。以病理组织学技术对MO的致病机理进行研究。用SDS—PAGE法将分离株与三种支原体标准株进行菌体主要蛋白抗原多肽分析。结果表明，MO在37℃，pH7.8的KM2和Hayflick培养基中都能良好生长。除基础营养物质外，培养基添加15％以上血清时MO生长旺盛，低于10％MO不生长。三种血清培养效果马血清＞兔血清，灭活的猪血清培养效果最差。MO菌落为无中心脐的“桑椹”状，明显区别与典型的“煎蛋状”菌落。电镜下菌体无细胞壁，细胞膜由三层膜组成，胞内含有颗粒状核糖体，在细胞膜外有一层绒毛状的荚膜。用微量间接血凝试验对河北省四个地区的MO感染情况进行流行病学调查，MO在秋末春初气候寒冷多变的季节多发，阳性检出率为24.1％。分离到的6株支原体野生株，通过生化特性、菌落形态、返祖试验、生长抑制试验和代谢抑制试验等鉴定认为它们是绵羊肺炎支原体菌株。MO对羊的主要侵害器官为肺脏，通过组织切片HE染色观察，发现在气管和支气管周围以及肺泡内有大量单核细胞聚集。 MO是山羊和绵羊呼吸道感染常见病原体之一，在世界上多个国家地区普遍流行，造成巨大经济损失。因此，寻找快速准确诊断MO的方法以便于早诊断、早治疗，对于减少损失是必要的。分离培养方法耗时、困难，特别是对于难培养的支原体；血清学诊断方法也是支原体感染通常使用的方法，然而种间的交叉反应，非特异性反应的存在，极大阻碍了血清学方法的应用。此外，鉴定支原体分离株需要对应的特异的高免血清，而这些血清是不易得到的。PCR的方法克服了这些缺点，它已经成为一种非常有效的检测微生物的方法。本次试验根据MO的标准株Y98的16S rRNA基因两端的保守区设计一对引物(ZW-5’和ZW-3’)用于PCR法快速诊断MO，同时用肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae，下称Mp)FH株、M.Myc.sub.Myc.标准株Y-goat、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌作对照，通过PCR可以明显的区分出这这几种病原体，并可扩增出MO的分离株HD—1。 本试验采用两种方法制备PCR模板：常规制备DNA法和煮菌法。两种方法进行PCR都得到满意的结果。用煮菌法进行支原体的PCR检测在国内报道中未见先例，试验证明煮菌法操作简便、经济的方法，比提取DNA作为模板进行PCR更适用于临床检测。 用煮菌法进行临床标本检测，52份疑为绵羊肺炎支原体感染的临床标本，同时用支原体分离培养法作对照。结果用培养法有6份鉴别培养基由红色变为黄色，为阳性；PCR检测有14份为阳性结果。PCR方法克服了血清方法存在的交叉反应的弊端，而且特异性强，敏感性高，是支原体诊断的一种可靠的诊断方法。