【摘 要】
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莲草直胸跳甲(Agasicles hygrophila)是国内外成功控制喜旱莲子草(Alternanthera philoxeroides)的天敌昆虫,小分子热激蛋白(sHSPs)基因对昆虫的生长发育和抵御环境胁迫具有重要作用。我们前期研究发现小分子热激蛋白基因与莲草直胸跳甲的生长发育密切相关,在蛹期大量表达,为揭示小分子热激蛋白基因在莲草直胸跳甲生长发育中的功能作用,我们以蛹期表达量较高的sHS
【基金项目】
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国家自然科学基金(No:31500304); 山西省重点研发计划项目(No:201803D221004-6);
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莲草直胸跳甲(Agasicles hygrophila)是国内外成功控制喜旱莲子草(Alternanthera philoxeroides)的天敌昆虫,小分子热激蛋白(sHSPs)基因对昆虫的生长发育和抵御环境胁迫具有重要作用。我们前期研究发现小分子热激蛋白基因与莲草直胸跳甲的生长发育密切相关,在蛹期大量表达,为揭示小分子热激蛋白基因在莲草直胸跳甲生长发育中的功能作用,我们以蛹期表达量较高的sHSP20.8为研究对象,利用q PCR分析了sHSP20.8在莲草直胸跳甲所有发育阶段和蛹期不同时间点的表达模式,进一步通过RNAi技术研究了沉默sHSP20.8对其雌雄虫蛹期发育历期、羽化率、及交配后雌雄虫寿命、产卵天数、产卵量、后代孵化率等指标的影响。主要研究结果如下:1)sHSP20.8的克隆鉴定。莲草直胸跳甲sHSP20.8完整编码区为543 bp,编码180个氨基酸,分子量为20.8 k Da,等电点为6.45,编码蛋白含有小分子热激蛋白的典型保守结构域和特征基序,定位于细胞核。系统发育分析进一步表明sHSP20.8属于小分子热激蛋白家族,并与鞘翅目昆虫单独聚类。2)sHSP20.8的时空表达模式。利用qPCR分析sHSP20.8在莲草直胸跳甲不同发育阶段和蛹期不同时间点的表达模式发现,卵期及蛹期表达量较高,从化蛹至1日龄表达量逐渐升高,1日龄蛹相对表达量达到最高,2日龄蛹开始相对表达量急剧下降并持于稳定。表明sHSP20.8可能参与调控莲草直胸跳甲蛹期至成虫期的变态发育过程。3)基于RNAi的功能验证。RNAi沉默莲草直胸跳甲蛹期sHSP20.8的表达,结果表明,干扰sHSP20.8后蛹的发育历期明显缩短,后期成虫的产卵量与对照组相比差异显著,另外发现成虫前8日内产卵的孵化率显著低于对照组,尤其前2日卵的孵化率为4%和9%,显著低于对照组89%和86%。为进一步探讨sHSP20.8影响跳甲生殖力的深层原因,我们通过干扰后的雌雄虫与野生型交叉配对试验,结果表明干扰雌虫可能对其生殖力起关键作用。综合以上结果可以看出,小分子热激蛋白基因与莲草直胸跳甲的生长发育和生殖密切相关,具有重要的调控作用,但其调控机制还有待进一步深入研究。本研究拓展了我们对热激蛋白基因,尤其是小分子热激蛋白基因的传统认识,为揭示热激蛋白基因新的功能作用提供重要参考。
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