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目的：利用RNAi技术干扰GAS41表达,检测胶质母细胞瘤细胞系A172早期凋亡情况。从而在细胞水平上,初步了解GAS41在胶质瘤中作用,并为后续胶质瘤的诊断和治疗提供一定的实验根据。方法：1.分析较佳转染复数(MOI)：体外培养A172细胞,取对数生长期细胞进行实验。设计转染复数梯度：5,10,15。慢病毒介导GAS41-siRNA转染A172细胞,处理8h。在荧光显微镜下,分别计算暗视野与相同区域亮视野的细胞数目。2. GAS41, p21与p53表达情况：体外培养A172细胞,取对数生长期细胞进行实验。设空白组和实验组(GAS41-siRNA, dsRNA,转染试剂),处理8h。RT-PCR检测GAS41的RNA水平表达情况,Western blot分别检测GAS41、p53与p21的蛋白表达情况。3.流式细胞术检测细胞凋亡情况：体外培养A172细胞,取对数生长期细胞进行实验。设空白组与实验组(GAS41-siRNA, GAS41-dsRNA,转染试剂),处理8h,各实验组分别做三个重复试验。Anexin V/FITC和碘化丙啶染色处理后,上机计数。结果：1.随着转染复数增大,细胞数目明显减少,细胞形态严重变形。当MOI=10时,细胞状态较好,荧光强度较强。经过显微镜下计数和χ2检验,MOI=10为较佳转染复数(p<0.05)。2.GAS41、p21与p53的表达情况：RT-PCR检测发现,GAS41各实验组表达均明显低于空白组(p<0.05)。实验组中,GAS41-siRNA干扰组低于其他实验组(p<0.05)。Western blot结果表明,GAS41-siRNA干扰组蛋白表达量最低,其他实验组和空白组均明显高于GAS41-siRNA干扰组。而p53与p21的表达趋势相同,实验组均高于空白组,且GAS41-siRNA干扰组表达量最高。3.流式细胞术计算凋亡细胞数：四个象限中,取各组第四象限即早期凋亡的细胞比例作比较。GAS41-siRNA干扰组、dsRNA-siRNA干扰组、转染试剂组和空白组的细胞凋亡率分别为19.58±2.52%、4.87±0.38%、5.45±1.03%、1.15±0.29%。GAS41-siRNA干扰组凋亡率明显高于其他各组(p<0.05),dsRNA-siRNA与转染试剂组无显著差异(p>0.05),而实验组与空白组存在显著差异(p<0.05)。结论：1.干扰GAS41可促进A172细胞凋亡。2.干扰GAS41,导致p53和p21表达上调。提示干扰GAS41引起的凋亡,通过p53途径实现。