“嗅三针”干预疗法对帕金森病小鼠嗅球超微结构及GFAP表达的影响

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目的:观察“嗅三针”干预疗法对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)经鼻诱导的帕金森病小鼠嗅球超微结构和中脑黑质胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的影响,从干预嗅觉障碍的角度阐明帕金森病防治的机制及可能性,为帕金森病的诊治提供思路及证据。方法:将KM雄性小鼠60只,随机分为正常对照组(Blank),帕金森模型组(Model),嗅三针干预组(XSZ),西药左旋多巴组(L-DOPA),每组15只。帕金森模型组、嗅三针干预组及左旋多巴组均用经鼻灌注LPS的方法建立帕金森模型,每天1次,每侧鼻孔10μL,持续2个月。正常对照组滴生理盐水。在LPS的灌注过程中注意保持枪头在注入的过程中不能过深过快,避免造成肺部的急性应激性损伤。8周造模结束后,各造模组剔除不合格小鼠,剩余10只,空白组随机剩余10只,进行下一步实验。嗅三针组采用电针干预,取穴:印堂穴(在小鼠两眼中点偏上2mm处),双侧迎香穴(小鼠鼻孔外侧上端,有毛与无毛交界处)。迎香穴向内上方斜刺2mm,印堂穴向鼻根平刺2mm,电针使用疏密波,强度1mA,正极和负极接印堂穴和左侧或右侧迎香穴,每侧各刺激时间10分钟,共20分钟,1次/日,5日为一个疗程,休息2天,共进行4个疗程。西药组予以L-DOPA注射液,每日同一时间点腹腔注射一次,5日为一个疗程,休息2天。四个疗程后处死小鼠,透射电镜观察嗅球超微的结构变化以及免疫印迹法测定中脑黑质GFAP表达的变化。结果:透射电镜下嗅球超微结构显示,PD模型组小鼠嗅球组织细胞超微结构病理改变明显。Western Blot实验结果中,与正常对照组相比,PD模型组小鼠中脑黑质GFAP表达增加(P<0.001)。嗅三针干预组不仅修复了嗅球超微结构的改变,还减少了黑质GFAP的表达(P<0.01)。结论:“嗅三针”干预疗法可以改善LPS经鼻诱导的帕金森病模型小鼠行为学障碍,其机制可能与“嗅三针”通过嗅觉传导保护嗅球及降低黑质GFAP的表达有关。
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