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杀菌/通透性增加蛋白(bactericidal/permeability increasing protein,BPI-Like)是抗菌肽家族的主要成员之一。目前哺乳动物中有关BPI-Like的研究主要集中在其免疫功能,但在硬骨鱼类中有关BPI-Like及其功能研究还不够明确。为此,本文以卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)为研究对象,克隆并鉴定了卵形鲳鲹BPI-Like(TroBPI-Like)基因的全长,并且分析了其序列结构特点,初步研究了 TroBPI-Like基因的抗菌生物学功能。主要内容及结果如下:1、从卵形鲳鲹头肾中克隆得到了 TroBPI-Like的cDNA序列。序列同源性分析表明,TroBPI-Like与其他鱼类BPI-Like结构相似,特别是与同为鲈形目的条石鲷的基因序列同源性较高。qRT-PCR分析结果显示,在健康卵形鲳鲹中,TroBPI-Like在胃、鳃、皮肤、心脏、肌肉、肠、脑、血液、头肾、心脏、肝脏、和脾脏中都有表达,且在免疫器官肝脏、脾脏、头肾中表达量较高,在胃和鳃的表达量最低;在迟缓爱德华氏菌刺激下,卵形鲳鲹肝脏、脾脏、头肾等免疫相关组织的TroBPI-Like表达量显著升高,其中肝脏组织最高升高7倍,脾脏组织中最高升高26倍,头肾组织中最高升高14倍。2、成功构建了 TroBPI-Like的原核表达载体,并诱导表达获得了融合蛋白rTroBPI-Like,经检测发现,该融合蛋白rTroBPI-Like不可溶。对rTroBPI-Like进行复性并研究其抗菌活性,结果发现到该蛋白有显著的抗迟缓爱德华氏菌活性。最后,本研究还制备了 TroBPI-Like多克隆抗体,并通过酶联免疫吸附测定法(ELISA)证明该抗体的有效稀释度达到1:25600、免疫印迹法(Western blot)证明该抗体具有较高特异性,为后续从蛋白水平研究其功能奠定基础。3、成功构建了 TroBPI-Like的真核表达载体(pTroBPI-Like),并研究其体内抗菌功能。结果表明,当TroBPI-Like在鱼体里过量表达时,可显著抑制迟缓爱德华氏菌的生长,其中肝脏中最高抑制率是对照组的11.76倍,脾脏中最高抑制率是对照组的8.0倍,头肾中最高抑制率是对照组的5.91倍;而干扰TroBPI-Like在鱼体内的表达时,TroBPI-Like在卵形鲳鲹肝脏、脾脏、头肾等免疫相关组织中的表达水平显著降低,且鱼体内迟缓爱德华氏菌侵染量也显著增加,最高增加量分别为对照组的9.87倍,3.8倍,8.5倍。这些结果表明,在硬骨鱼卵形鲳鲹中,TroBPI-Like对于抵抗病原菌侵染发挥着重要作用,本研究结果将丰富卵形鲳鲹抗细菌免疫的机制,有助于开发研制新型抗菌肽类药物来对抗耐药菌株,并将其应用于在医学、养殖业、农业等领域。