多发性骨髓瘤(Multiple Myeloma,MM)是第二大常见的恶性血液病,特征为浆细胞恶性大量增生、单克隆免疫球蛋白过量分泌、正常免疫球蛋白减少、广泛溶骨病变和骨组织疏松。硼替佐米(BTZ)是一种二肽硼酸盐类似物,是第一个获得FDA批准的用于治疗难治性及复发性MM的蛋白酶体抑制剂,它通过硼酸键和蛋白酶体活性位点上的苏氨酸残基结合来阻止泛素蛋白的降解,促进细胞凋亡。但是BTZ的临床应用仍然存在一些问题,如进入血液后很快被清除,选择性低,毒副作用大,其在治疗过程中通常伴随着血小板减少、周围神经病变、呕吐、贫血等。为了提高BTZ的治疗效果,降低其毒副作用,人们设计了不同形式的纳米载体,如胶束、脂质体、纳米粒子和大分子前药等来递送BTZ。然而,多数载体对BTZ的载药量低,载体在肿瘤组织富集量少等仍然是BTZ载体所面临的问题。基于此,我们制备了壳为透明质酸、核为双硫交联、载硼替佐米的胶束(HA-CCMs-BP)用于MM的靶向治疗。HA-CCMs-BP对BP的载药量为7.3 wt.%,粒径为78 nm,在10%的胎牛血清(FBS)中有良好的稳定性,并且能在细胞内还原环境下快速将BP释放出来。细胞毒性实验(MTT)结果证明,HA-CCMs-BP对于CD44过表达的人多发性骨髓瘤LP-1细胞有更好的抗肿瘤效果,半抑制浓度(IC50)为0.023 μg/mL,与自由BP相比细胞毒性提高了 1.6倍。流式细胞术(FACS)和激光共聚焦显微镜(CLSM)结果显示HA-CCMs-BP能够主动靶向到LP-1细胞。体外蛋白酶体抑制实验表明18 h后,HA-CCMs-BP与自由BTZ达到相近的蛋白酶体抑制水平。体内成像和血液循环实验结果表明,与经HA预处理封闭CD44受体组相比,HA-CCMs能够显著增强纳米粒在肿瘤部位的富集,并延长血液循环时间。我们采用荷LP-1皮下多发性骨髓瘤裸鼠来探究该混合胶束的体内抗肿瘤活性,治疗结果显示,HA-CCMs-BP(0.5 mg/kg)与相同剂量自由BTZ相比有更好的肿瘤抑制效果。特别的,HA-CCMs-BP在剂量为3 mg/kg时抑制效果最明显,肿瘤抑制率(TIR)为81.8%,小鼠的中位生存时间延长至62天(自由BTZ 0.5 mg/kg:34天)。这种高载药量、制备简单、多功能性的HA-CCMs-BP为人多发性骨髓瘤的治疗提供了更有效的平台。不同作用机制的药物联用已经成为治疗癌症的有效方法之一。BTZ和脂质体阿霉素(Lipo-DOX)的联合用药已经被FDA批准用于MM的治疗。但是联合治疗方案中BTZ带来的副作用仍然不可忽视,另外BTZ和Lipo-DOX的药代动力学有很大的差别,在静脉注射后,BTZ很快地被红细胞摄取,迅速被血浆清除,与此相反,Lipo-DOX在体内的半衰期长达55 h,药物释放非常缓慢,所以两种药物很难以最佳的比例在肿瘤部位起作用。在第三章中,我们用HA-CCMs分别包载BP和阿霉素(DOX)制备了壳为透明质酸、核为双硫交联、可生物降解的HA-CCMs-BP/DOX混合胶束,用于MM的联合靶向治疗。HA-CCMs-BP/DOX粒径在90 nm左右,分布均一,对BP和DOX的载药量分别为7.3 wt.%和8.9 wt.%。体外释放实验表明,HA-CCMs-BP/DOX释放曲线基本一致,有相似的药物释放行为。在MTT实验中,我们为了确定混合胶束中BP和DOX对人多发性骨髓瘤LP-1细胞协同作用的最佳药物比例,设计了含有BP和DOX不同摩尔比的混合胶束。结果显示,当混合胶束中BP和DOX的药物摩尔比为1/3时显示出最强的协同作用。我们采用荷LP-1皮下多发性骨髓瘤裸鼠来探究该混合胶束的体内抗肿瘤活性,实验结果表明,相比自由BTZ和 Lipo-DOX 联合治疗组,HA-CCMs-BP/DOX 在 BP/DOX 的药量为 1/4.2 mg/kg(摩尔比:1/3)时有更高的抗肿瘤的活性,TIR由32.5%增加到72.5%。以上结论说明,该HA-CCMs-BP/DOX混合胶束可实现细胞内确定比例的药物释放,提高联合治疗的效果,在治疗多发性骨髓瘤方面具有良好的临床应用前景。