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烟色烟管菌(Bjerkandera fumosa)是担子菌门(Basidiomycota)的一种药用真菌,在民间具有广泛应用,但其活性组分及作用机制尚不清楚。本实验室前期对烟色烟管菌的液体发酵及菌丝体多糖的结构、理化性质及其免疫活性进行了系统研究,本论文在此基础上以葡萄糖为碳源发酵烟色烟管菌,对其胞外多糖进行制备、分离纯化、性质、结构和生物活性的相关研究。主要研究结果如下:(1)烟色烟管菌胞外多糖的制备及理化性质分析以葡萄糖液体发酵培养基培养烟色烟管菌,制备胞外多糖EPBF,得率为0.9g/L。理化性质分析结果表明,EPBF主要由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、岩藻糖以57.6:1.9:2.5:25.2:6.2:4.7:2.0的摩尔比组成,不含核酸和蛋白质;其平均分子量为3.5×10~5 Da;总糖、糖醛酸、多酚和灰分含量分别为63.57%、7.98%、0%和15.46%。(2)烟色烟管菌胞外多糖的分离纯化、结构及理化性质分析EPBF经DEAE-32纤维素阴离子层析和Sepharose G-75凝胶层析柱分离后,得到纯化组分EPBFG。通过HPGLC检测该组分为均一多糖,分子量为4.4×10~4Da。经测定其主要由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖以摩尔比为49.9:3.5:2.2:26.9:4.4:11.2组成;总糖和灰分含量分别为61.98%和6.34%。FT-IR和NMR分析结果显示EPBFG主要由α-Glc,α-Gal和α-Man构成,同时EPBFG不含有肽链或蛋白质,组分EPBFG的糖环形式为吡喃糖环,糖苷键构型为α型。(3)烟色烟管菌胞外多糖的生物活性研究测定了烟色烟管菌胞外多糖EPBF及其纯化组分EPBFG的抗氧化活性。结果显示在5 mg/mL条件下,两者的DPPH自由基清除活性分别为70.22%和83.89%,羟基自由基清除活性分别为70.99%和81.87%,亚铁离子螯合活性分别为78.29%和90.15%;12 mg/mL条件下,还原力分别为0.59和0.75。且抗氧化活性均以剂量依赖的方式增加,纯化组分EPBFG的抗氧化活性高于EPBF。同时检测了烟色烟管菌胞外多糖EPBF及其纯化组分EPBFG的体外抗肿瘤活性。研究显示EPBF及EPBFG对宫颈癌Hela细胞株的增殖有一定的抑制作用,并且对正常人体细胞H8细胞株没有毒害作用。相同浓度下纯化组分EPBFG的体外抗肿瘤活性高于EPBF。在2.5 mg/mL浓度下EPBFG对Hela细胞株抑制率达到48.44%。EPBFG在低浓度(≤1.5 mg/mL)时可以促进H8细胞株的增殖,浓度升高时抑制其增殖,但是抑制率均小于3%。利用流式细胞仪对多糖的抗肿瘤机理进行检测,推测EPBFG是通过抑制细胞周期的方式抑制Hela细胞株的增殖,从而发挥抗肿瘤作用。