【摘 要】
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鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium,S.typhimurium)是一种对人畜有严重危害的食源性致病菌。传统的抗生素疗法已经诱发了沙门氏菌耐药、肠道菌群失调等问题,益生菌对食源性致病菌的防治具有天然、无副作用等优点,这种新型微生态疗法正逐渐被公众关注。本研究从8株益生菌菌株中筛选出一株短双歧杆菌YH68,其无细胞发酵上清液(Cell-free supernatant,CFS
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鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium,S.typhimurium)是一种对人畜有严重危害的食源性致病菌。传统的抗生素疗法已经诱发了沙门氏菌耐药、肠道菌群失调等问题,益生菌对食源性致病菌的防治具有天然、无副作用等优点,这种新型微生态疗法正逐渐被公众关注。本研究从8株益生菌菌株中筛选出一株短双歧杆菌YH68,其无细胞发酵上清液(Cell-free supernatant,CFS)对S.typhimurium具有较强的抑制活性,抑菌直径为(22.27±0.44)mm。初步确定其中起抑菌作用的成分主要为有机酸并存在部分蛋白类抗菌物质。利用微量稀释法确定YH68 CFS拮抗S.typhimurium的最小抑菌浓度和亚抑制浓度,并通过扫描电镜、电导率测定、激光共聚焦等实验从S.typhimurium的形态结构、细胞膜通透性和完整性的变化来探索YH68 CFS对S.typhimurium的抑制机制,通过荧光定量和细胞侵染实验考察YH68CFS对S.typhimurium致病能力的影响。结果显示YH68 CFS对S.typhimurium的最小抑菌浓度为250μL/mL,此时抑制靶点在致病菌的细胞膜上,通过改变S.typhimurium细胞膜的通透性并进一步将其完整性破坏,使胞内物质流出,最终导致S.typhimurium无法正常生长;亚抑制浓度为62.5μL/mL,此时YH68 CFS不抑制S.typhimurium生长,却能通过下调S.typhimurium致病基因的表达来削弱其对宿主的感染作用。本研究筛选出的短双歧杆菌YH68其CFS对S.typhimurium具有较强的拮抗活性,可作为潜在益生菌应用于食品或制药行业中S.typhimurium感染的防治,具有成为抗生素替代品的潜力。
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