循经选穴针刺失眠大鼠对HPA轴相关激素及下丘脑5-HT受体mRNA表达的研究

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目的:以失眠大鼠为受试对象,采用固定局部取穴,配伍不同经脉的腧穴进行对比研究,观察循经选穴针刺治疗对失眠大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(hypothalamic-pituitary-thyroid,HPA)相关激素、下丘脑5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)受体mRNA表达的影响,探讨循经选穴对腧穴配伍效应的影响。方法:腹腔注射对氯苯丙氨酸(dl-4-chlorophenylalanine,PCPA)混悬液建立失眠模型大鼠,将60只SD大鼠随机分为5组,即:空白组、模型组、百会+神门组、百会+三阴交组、百会+非经非穴组,每组12只。各治疗组针刺相应腧穴,每次30min,治疗7天。采用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(corticotrophin-releasing hormone,CRH)及血清促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)、皮质酮(corticosterone,CORT)的含量;运用实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR,RT-PCR)检测大鼠下丘脑5-HT1a、5-HT2a受体mRNA表达量。结果:1.造模前后戊巴比妥钠翻正实验:空白组造模前后睡眠潜伏期差异无统计学意义(P>0.05),睡眠总时间差异无统计学意义(P>0.05);模型组大鼠注射戊巴比妥钠后,与造模前相比,造模后睡眠潜伏期显著多于造模前,差异具有统计学意义(P<0.05),睡眠总时间显著少于造模前,差异具有统计学意义(P<0.05),提示造模成功。2.治疗前后戊巴比妥钠翻正实验:睡眠潜伏期比较:与空白组比较,模型组延迟(P<0.05);与模型组比较,三个治疗组均提前(P<0.05);治疗组之间无明显差异(P>0.05);睡眠时间比较:与空白组比较,模型组减少(P<0.05);与模型组比较,百会+神门组延长(P<0.05),百会+三阴交组、百会+非经非穴组无显著变化(P>0.05);治疗组之间比较,百会+神门组长于百会+三阴交组、百会+非经非穴组(P<0.05)。3.循经选穴针刺对失眠大鼠HPA轴相关激素的影响:与空白组比较,模型组大鼠下丘脑CRH、血清ACTH、CORT含量显著增加(P<0.01);与模型组比较,百会+神门组、百会+三阴交组大鼠下丘脑CRH、血清ACTH、CORT含量明显降低(P<0.01),百会+非经非穴组血清ACTH含量明显降低(P<0.05),血清CORT含量均显著降低(P<0.01),百会+非经非穴组大鼠下丘脑CRH含量变化则无统计学意义(P>0.05)。与百会+神门组比较,百会+三阴交组、百会+非经非穴组大鼠下丘脑CRH含量差异无统计学意义(P>0.05),血清ACTH含量明显升高(P<0.01),血清CORT含量明显升高(P<0.05)。与百会+三阴交组比较,百会+非经非穴组大鼠下丘脑CRH含量明显升高(P<0.05),血清CORT含量明显升高(P<0.01),血清ACTH含量差异无统计学意义(P>0.05)。4.循经选穴针刺对失眠大鼠下丘脑5-HT1a、5-HT2a受体mRNA表达的影响:与空白组比较,模型组大鼠下丘脑5-HT1a受体mRNA表达量显著降低(P<0.01),5-HT2a受体mRNA表达量显著升高(P<0.01),具有统计学意义;与模型组比较,百会+神门组5-HT1a受体mRNA表达量明显升高(P<0.01),5-HT2a受体mRNA表达量明显降低(P<0.01);与百会+神门组比较,百会+三阴交组及百会+非经非穴组5-HT1a受体mRNA表达量明显减少,显著性分别为(P<0.05)和(P<0.01),具有统计学意义,百会+三阴交组5-HT2a受体mRNA表达量无明显变化(P>0.05),百会+非经非穴组5-HT2a受体mRNA表达量明显升高(P<0.05),具有统计学意义;与百会+三阴交组比较,百会+非经非穴组5-HT1a、5-HT2a受体mRNA表达量无明显差异。结论:针刺可能通过调节HPA轴相关激素水平及5-HT1a、5-HT2a受体mRNA表达从而起到镇静安神的作用。循经选穴针刺可能是影响腧穴配伍效应的影响因素之一。
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