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乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,2020年最新数据显示全球乳腺癌新发病例高达226万例,已成为全球第一大癌症。近年来,随着癌症防治意识的提高,乳腺癌检出率有所提高,乳腺癌的治疗方式较全面,可显著延长乳腺癌患者生存期。但随着乳腺癌患者生存期延长,后期随访不及时,早期乳腺癌骨转移容易漏诊,一旦发生乳腺癌骨转移,治疗效果不甚理想,患者生活质量大大下降,并发生一系列骨相关不良事件（skeletal-related events,SREs）,生存期显著缩短。目前骨转移机制研究主要是核因子κB受体活化因子（RANK）/核因子κB受体活化因子配体（RANKL）/骨保护素（OPG）信号通路。虽然通过RANKL依赖通路治疗的疗效显著,但仍有部分患者使用地舒单抗治疗无效,这表明我们需要寻找新的抑制骨破坏的有效治疗靶点。因此,本研究从乳腺癌骨转移分子机制为切入点,寻找新的分子靶点,从而为乳腺癌骨转移提供新的治疗方向。环状RNA（circular RNA,circRNA）是一种单链RNA经过一系列转录加工而形成的环状结构,其作为一种非编码长链RNA,已被证实可作为其他RNA的转录的潜在调控因子。circRNA可影响细胞过程,从细胞发育到肿瘤生长过程中都起关键作用,现作为明星分子在肿瘤领域中的研究越来越多。circRNA可通过多种方式参与乳腺癌侵袭和转移过程,并且由于其特殊的闭环结构特征,可稳定存在于细胞质中不被降解,以及其疾病特异性,使得circRNA可作为肿瘤早期筛查和评价预后的标志物、在阐明肿瘤发生发展的具体机制及研发新的有效的靶向药物中发挥重要作用。本研究通过对乳腺癌癌细胞系MDA-MB-231和高骨转移株231-B细胞进行circRNA高通量测序及分析得出379个差异表达的circRNAs,其中356个上调的circRNAs,23个下调的circRNAs。通过文献检索对比显著差异表达的circRNAs,以及生物学信息分析预测其下游靶miRNA和靶基因,分别验证其在乳腺癌骨转移患者组织标本中的表达水平。最终本研究确定hsacircRNA0000231—miR-135b-5p—ARHGAP12 轴,hsacircRNA0000231在乳腺癌骨转移标本中高表达。通过一系列体外功能实验证实作为miR-135b-5p海绵,敲减其表达水平,可促进miR-135b-5p的表达,从而调控ARHGAP12蛋白表达水平,抑制乳腺癌细胞迁移和转移,而不影响乳腺癌细胞增殖。当乳腺癌患者hsacircRNA0000231表达量高时,即使肿瘤体积不大,但仍有已发生骨转移的可能性。本研究通过对乳腺癌骨转移标本实时荧光定量PCR,充分证实了乳腺癌骨转移组织中hsacircRNA0000231高表达,有作为早期乳腺癌骨转移的肿瘤标志物潜在价值,帮助早期乳腺癌骨转移诊断、早期进行干预治疗;另外了通过一系列体外实验也有力证实了 hsacircRNA0000231在不影响乳腺癌细胞增殖情况下,促进发生迁移和 转移;最后 本研 究 明 确hsacircRNA0000231/miR-135b-5p/ARHGAP12 轴,首次提出 ARHGAP12 在乳腺癌骨转移中的作用机制,将进一步后续实验验证其具体调控RhoA和Rac1稳态,促进乳腺癌骨转移机制,为乳腺癌骨转移患者的精准治疗提供新的靶点。目的:系统评价乳腺癌发生骨转移的危险因素并进行分析,为骨转移的早期预防提供临床证据。方法:我们系统性的检索了 the Cochrane Library,PubMed,Web of Science,and EMBASE中有关乳腺癌骨转移的相关文献。语种限定为英文。发表时间为2001年1月1日-2019年12月31日。有两名研究员分别独立进行文献的浏览及评估。纳入文献的质量评价采用NOS评分。选择NOS评分≥6分的研究纳入乳腺癌发生骨转移相关因素的分析中。以OR作为合并效应量。结果:我们共纳入了18篇文章,包括11项回顾性研究和7项横断面研究。11篇文章研究NOS评分范围为6-9分,其中6分研究3项,7分研究2项,8分研究4项,9分研究2项。7项横断面研究中,AHRQ评分8分研究3项,9分研究3项,10分研究1项。分析结果显示,孕酮受体（PR）阳性的乳腺癌患者骨转移的风险更低（I2=45.9%,OR=0.80,95%CI:0.72,0.88,P<0.001）。HER2 阳性乳腺癌患者发生骨转移风险更高（I2=80.0%,OR=1.36,95%CI:1.04,1.79,p=0.025）。有淋巴结转移者发生BM的危险性高于无淋巴结转移者（I2=99.7%,OR=2.60,95%CI:1.41,4.80,p=0.002）。T2期的乳腺癌患者发生骨转移风险是T1期的 1.99 倍（I2=96.8%,OR=1.99,95%CI:1.03,3.83,p=0.040）;4 项研究数据合并后显示T3期的乳腺癌患者发生骨转移风险是T1的4.74倍（I2=95.6%,OR=4.74,95%CI:9.90,11.73,p=0.001）;3项研究数据合并后显示T4 stage的乳腺癌患者发生骨转移风险是T1的14.57倍（I2=95.4%,OR=14.57,95%CI:4.16,51.05,p<0.001）。非Lobular或Ductal的乳腺癌患者的骨转移发生率高于Ductar乳腺癌患者,差异有统计学意义（I2=56.4%,OR=1.26,95%CI:1.09,1.45,p=0.001）。结论:PR阳性的乳腺癌患者发生骨转移的风险更低。HER2阳性、淋巴结转移阳性、非Lobular或Ductal型的乳腺癌患者发生骨转移的风险较高。随着T分级升高,乳腺癌患者的骨转移风险也随之升高。