生物膜是由细菌细胞和细菌胞外水合性基质所组成的细菌群体,可以依附于机体组织器官或者是某些惰性材料的表面。胞内菌是当机体被细菌感染后在宿主细胞内寄居的细菌。与浮游菌相比,生物膜细菌和胞内寄生菌对抗菌剂表现出更强的耐药性。临床上通常采用增大抗生素的用量和延长给药时间等手段来治疗生物膜和胞内菌相关感染,然而,大剂量和长时间的抗生素治疗,容易诱发细菌耐药,同时累积对人体的毒副作用。许多研究证实,负载抗生素的脂质体可以阻止微生物进行聚集,并且具有良好的生物相容性,因此有望用于清除细菌生物膜和胞内寄生菌。本实验的主要研究内容是合成了一种负载庆大霉素的磷脂-壳聚糖纳米粒子(GPC NPs),并且测试了其对生物膜和胞内菌的作用效果。使用壳聚糖形成的纳米粒子作为内核,纳米粒子外组装上由卵磷脂形成的脂质囊泡,利用静电吸附作用将庆大霉素吸附到磷脂的表面。实验采用场发射扫描电镜(SEM)、动态光散射粒度仪(DLS)和红外光谱仪(IR)对合成的纳米粒子的结构进行了表征。对于合成的纳米粒子,在改变了pH值和离子强度之后,测定了其在不同的条件下对庆大霉素的吸附和释放情况。GPC NPs的生物活性实验结果显示,其保留了对浮游菌的作用效果,并且对已经形成的几种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细菌生物膜具有很好的破坏作用。生物膜实验测试了GPC NPs对单增李斯特菌和铜绿假单胞杆菌在不同时间段形成的生物膜的破坏作用,采用荧光显微镜对GPC NPs作用后的单增李斯特菌的细菌生物膜的形态和结构进行观察,发现GPC NPs作用生物膜后可以减少生物膜聚集。GPC NPs对胞内菌的作用结果显示,GPC NPs对于清除胞内菌具有一定的作用效果。以上实验结果显示GPC NPs可以提高庆大霉素的作用效果,减少庆大霉素的用量,拓展了抗生素的应用范畴,在一定程度上有助于减缓耐药菌的产生。本实验的研究结果为今后在治疗由细菌生物膜和胞内菌引起的一系列感染问题方面提出了一种可供选择的方法和思路。