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目的:通过建立创伤后应激障碍(PTSD)的大鼠模型,研究补肾填精治法方药龟鹿二仙胶对PTSD大鼠的下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能和行为学变化的影响,并阐明其发挥作用的可能机制。方法:(1)采用单一延长应激(SPS)的方法建立PTSD的大鼠模型(2)采用旷场实验和高架十字迷宫实验动态检测大鼠的行为学表现。(3)在地塞米松抑制实验中,动态检测血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)水平.(4)采用ELISA法动态观察大鼠血浆中皮质酮(CORT)与促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)的含量变化。(5)采用RT-PCR法和免疫组化法检测海马及杏仁核脑区中糖皮质激素受体(GR)、盐皮质激素受体(MR)、促肾上腺皮质激素释放激素1受体(CRF1R)和促肾上腺皮质激素释放激素2受体(CRF2R)的表达。结果:(1)PTSD模型大鼠在造模后d 9开始出现行为学改变,并且这种改变在造模后d29、d30时仍然存在。表现为与正常组相比,模型组在d9高架十字迷宫实验中开放臂进入次数百分比明显下降(P<0.05),在d23高架十字迷宫实验中,开放臂停留时间百分比、开放臂路程百分比和开放臂进入次数百分比均明显下降(P<0.05),在d 29旷场实验中总路程明显下降(P<0.05),在d 30高架十字迷宫中开放臂停留时间百分比、开放臂路程百分比和开放臂进入次数百分比均明显下降(P<0.05)。龟鹿二仙胶给药21 d后能明显提高大鼠在旷场实验中的总路程(P<0.05)和在高架十字迷宫实验中的开放臂进入次数的百分比(P<0.05)。(2)与正常组相比,PTSD模型大鼠血浆ACTH水平在d 8、d 22和d 29时均明显下降(P<0.05)。龟鹿二仙胶给药14、21 d均能提高大鼠血浆ACTH水平(P<0.05)。(3)PTSD模型大鼠的血浆CORT水平呈现出从d8到d29逐渐升高的趋势,其中在d 29时与正常组相比明显升高(P<0.05)。与模型组相比,龟鹿二仙胶给药21 d后能明显降低大鼠的血浆CORT含量(P<0.05);各组大鼠在3个时间点检测的血浆CRH含量均无明显变化(P>0.05)。(4)与正常组相比,PTSD模型大鼠海马GR mRNA、MR mRNA、CRF1R mRNA表达均明显升高(P<0.05),CRF2R mRNA表达明显下降(P<0.05);杏仁核MR mRNA、CRF2R mRNA表达明显下降(P<0.05),GR mRNA、CRF1R mRNA下降无统计学差异(P>0.05)。与模型组相比,龟鹿二仙胶给药21 d后海马GR mRNA、MR mRNA、CRF1R mRNA的表达明显降低,CRF2R mRNA表达升高;杏仁核CRF2R mRNA表达明显升高,MR mRNA、GR mRNA、CRF1R mRNA变化无统计学差异(P>0.05)。(5)与正常组相比,PTSD模型大鼠海马GR、MR表达明显升高(P<0.05),CRF1R、CRF2R变化无统计学差异(P>0.05);杏仁核GR、MR、CRF1R表达均明显降低(P<0.05),CRF2R变化无统计学差异(P>0.05)。龟鹿二仙胶给药21d后能明显降低海马GR、MR的表达(P<0.05),升高杏仁核GR、MR、CRF1R的表达(P<0.05),海马CRF1R、CRF2R和杏仁核CRF2R变化无统计学差异(P>0.05)。结论:(1)SPS造模后d 9模型组大鼠开始出现行为学改变,表现为持续的焦虑样行为,并在d 29时出现自主活动下降。龟鹿二仙胶给药21 d后能降低大鼠焦虑样表现,提高自主活动能力。(2)PTSD模型大鼠在造模后d9时出现HPA负反馈增强,并在d29仍然存在,基础CORT含量呈现动态变化,在d 29时明显升高。龟鹿二仙胶给药14 d后能抑制HPA轴的负反馈增强,给药21 d后能抑制HPA轴负反馈增强的同时降低CORT含量。(3)龟鹿二仙胶能明显改善PTSD大鼠的行为紊乱,调节HPA轴负反馈增强,其作用机制可能跟龟鹿二仙胶调节海马和杏仁核中GR、MR和CRF1R的表达有关。