【摘 要】
：
目的：探讨鱼藤酮不同浓度及不同作用时间对中脑原代培养细胞的毒性作用，并初步探讨其毒性作用机理；研究辅酶Q10对鱼藤酮损伤的多巴胺能神经元损伤是否具有保护作用及其机制。方法：1、原代培养孕14 d的胎鼠中脑多巴胺能神经元至第6天，分别建立对照组、鱼藤酮组和辅酶Q10保护组：对照组：不加鱼藤酮；鱼藤酮A组、B组、C组：分别加入5 nmol·L-1、15 nmol·L-1、30 nmol·L-1终浓度的
论文部分内容阅读
目的：
探讨鱼藤酮不同浓度及不同作用时间对中脑原代培养细胞的毒性作用，并初步探讨其毒性作用机理；研究辅酶Q10对鱼藤酮损伤的多巴胺能神经元损伤是否具有保护作用及其机制。
方法：
1、原代培养孕14 d的胎鼠中脑多巴胺能神经元至第6天，分别建立对照组、鱼藤酮组和辅酶Q10保护组：对照组：不加鱼藤酮；鱼藤酮A组、B组、C组：分别加入5 nmol·L-1、15 nmol·L-1、30 nmol·L-1终浓度的鱼藤酮作用24 h；鱼藤酮D组、B组、E组：加入15 nmol·L-1终浓度的鱼藤酮分别作用12 h、24 h、48 h；辅酶Q10保护组(X、Y、Z组)：分别予以10 μmol·L-1、50 μmol·L-1、100 μmol·L-1终浓度的辅酶Q10预处理中脑多巴胺能神经元12 h后，再加入15 nmol·L-1终浓度鱼藤酮作用24 h。
2、倒置相差显微镜下观察细胞形态及数目变化，通过TH免疫细胞化学染色和PI荧光染色，荧光显微镜下观察TH阳性细胞的数目、形态状况和红色荧光细胞数目，LDH试剂盒测定LDH值以了解细胞活力，以罗丹明123染料进行流式细胞仪检测线粒体膜电位(△ψm)，以了解鱼藤酮对中脑原代培养细胞的毒性作用及辅酶Q10对鱼藤酮损伤的多巴胺能神经元损伤是否具有保护作用。
结果:
1、原代培养孕14 d胚胎SD大鼠中脑神经元后，于体外培养第6 d进行TH免疫细胞化学染色鉴定，结果显示，培养神经元中TH阳性细胞数目较多。
2、5 nmol·L-1鱼藤酮(鱼藤酮A组)干预多巴胺能神经元24 h后，TH阳性细胞数目减少，突起变短，PI染色阳性细胞数目增多，细胞LDH漏出率(U·mL-1)由329.41±7.78上升至418.62±13.54(P<0.05)，△ψm(％)由100±0明显下降至82.69±0.54(P<0.05)。随着鱼藤酮作用浓度的增高，TH阳性细胞数目进一步减少，突起变短甚至消失，PI染色阳性细胞数目进一步增多，15 nmol·L-1和30 nmol·L-1鱼藤酮组(鱼藤酮B组和鱼藤酮C组)的LDH值(U·mL-1)分别升至434.27±3.75(P<0.05)和447.62±6.53(P<0.05)，其△ψm(％)分别降至80.91±1.49(P<0.05)和70.54±7.59(P<0.05)。且鱼藤酮A组与鱼藤酮C组的LDH值也具有统计学差异(P<0.05)。
3、15 nmol·L-1鱼藤酮(鱼藤酮D组)干预多巴胺能神经元12 h后，TH阳性细胞数目减少，胞体变小变圆，突起变短，PI染色阳性细胞数目增多，细胞LDH漏出率(U·mL-1)由329.41±7.784上升至420.93±6.45(P<0.05)，Aψm(％)由100+0明显下降82.36+0.44(P<0.05)。随着鱼藤酮作用时间的延长，TH阳性细胞数目进一步减少，突起变短甚至消失，PI染色阳性细胞数目进一步增多， 15 nmol·L-1鱼藤酮作用24 h和作用48 h(鱼藤酮B组和鱼藤酮E组)后的LDH值(U·mL-1)分别升至434.27±3.75(P<0.05)和452.2l±11.44(P<0.05)，其△ψm(％)分别降至80.91±1.49(P<0.05)及62.66±2.50(P<0.05)。且鱼藤酮D组与鱼藤酮E组的LDH值也具有统计学差异(P<1.05)。
4、与鱼藤酮B组比较，辅酶Q10预处理X组，未见明显改变；而辅酶Q10预处理Y、Z组，TH阳性染色显示TH阳性细胞数目增多，突起较长，PI染色显示红色荧光细胞减少，LDH值分别降至410.24±11.29(P<0.05)和414.57±2.94(P<0.05)，△ψm(％)由80.91±1.49分别升至86.83±1.34(P<0.05)及91.13±5.01(P<0.05)。
结论：
1、鱼藤酮对中脑原代培养神经元具有明显毒性作用，能显著降低细胞活力及线粒体膜电位，其作用具有量-效倾向及时-效倾向。
2、鱼藤酮对中脑原代培养神经元的毒性作用很可能是通过破坏神经元线粒体功能实现的。
3、辅酶Q10能有效抑制鱼藤酮对中脑原代培养神经元的毒性作用，能保护细胞膜的完整性及线粒体膜电位的去极化，其保护作用具有量-效倾向。
4、辅酶Q10对鱼藤酮损伤的中脑原代培养神经元的保护作用可能是通过保护其线粒体功能实现。
其他文献
研究背景和内容：恶性淋巴瘤是一种复杂的系统性疾病，分为霍奇金氏病/淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤两大类，其中弥漫大B细胞淋巴瘤是最常见的NHL亚型。淋巴瘤的治疗及预后状况与其分期有密切的关系。PET/CT是以组织器官的解剖结构为基础的功能分子影像设备，它利用特异分子作为示踪剂，从分子及基因水平研究疾病发生、发展的病理变化。18F-FDG是目前应用最广泛的正电子显像药物。18F-FDG PET己成为HL和I
研究背景少支胶质细胞肿瘤(Oligodendrogliomas，OGs)是源于神经上皮组织的肿瘤之一，占神经系统原发肿瘤的5％～19％。同其它类型胶质瘤一样，OGs发生发展的机制尚未完全阐明；不同的是，OGs具有其自身独特的分子生物学特征，使其成为颅内原发肿瘤中第一个表现出“分子生物学特征”提供重要治疗和预后信息的肿瘤。积极探寻与肿瘤恶性程度和生存预后相关的分子标记物成为了当前OGs的研究热点。为
目的：通过分析大脑中动脉M1段狭窄或闭塞患者的CT灌注成像改变，探讨其在大脑中动脉狭窄患者中的临床应用价值。方法：11例经DSA检查确诊的大脑中动脉M1段狭窄或闭塞的患者，与7例经DSA检查证实的无局限性狭窄患者作对照。所有患者均行头颅CT灌注成像检查，并对其图象行定量分析。并同时行头颅CT和/或MRI检查。最后与DSA检查、CT和/或MRI检查结果进行对比分析。结果：1、11例患者的灌注图与对照
目的：慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种不完全可逆的气流受限为特征的常见慢性疾病,发病率和死亡率都很高,其发病机制目前尚未完全阐明,其中氧化应激及肺部的持续炎症可能起重要作用。Isoprostane F2a-Ⅲ(异前列烷F2a-Ⅲ),是体内氧化应激的重要标记物。本研究通过测定慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者和对照组尿中Isoprostane F2a-Ⅲ的水平,探讨COPD患者中氧化应激的水平。并通
目的：1．研究浙江汉族人线粒体DNA中tRNAThr，tRNAPro基因和剑桥标准序列（rCRS）的差异，筛查tRNAThr，tRNAPro基因变异的位点，以分析浙江汉族人的多态性位点是引起2型糖尿病的突变位点。2．探讨线粒体tRNAThr，tRNAPro基因变异与2型糖尿病主要临床生化指标及并发症的相关性。方法：1．根据1999年WHO糖尿病诊断标准，随机选取浙江汉族人群中确诊为F2DM的无血缘
[目的]探讨应用前列腺素E1脂微球载体制剂(liposomal prostaglandin E1,Lipo-PGE1)对围体外循(cardiopulmonary bypass，CPB)期脑损伤的保护作用及其可能机制。[方法]随机选取风湿性心脏瓣膜病手术患者30例，其中男性10例，女性20例，年龄32～60岁，平均年龄(41.7±7.7)。术前无心内膜炎、糖尿病、高血压、高脂血症、脑血管疾病、免疫系
目的：本实验旨用不同浓度雷公藤内脂醇对人上皮性卵巢癌耐顺铂细胞株(COC1/DDP)进行干预，观察其对体外培养的COC1/DDP活性的影响及作用时间和量效关系。以期寻找对耐顺铂治疗的上皮性卵巢癌病人的有效治疗药物。方法：1. COC1/DDP细胞的传代培养：COC1/DDP细胞用COC1/DDP完全培养基培养，将细胞密度调整至5×105/ml，置培养瓶中，在37℃、5％CO2，饱和湿度条件下于恒温
目的：探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2，MMP-2)及其抑制剂金属蛋白酶-2组织抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinasc-2，TIMP-2)和影响它们作用的转化生长因子-β1(transforming growth foctor beta，TGF—β1)在翼状胬肉中的表达及意义。方法：采用MAXvisionTM
目的：用放射性同位素131I标记HER2高亲和力模拟肽B2-S22-AFA，选用乳腺癌HER2高表达细胞株SKBR3及HER2低表达细胞株MDA-MB-231作为对照，观察131I标记B2-S22-AFA与乳腺癌细胞HER2受体的结合能力及其对乳腺癌细胞的靶向杀伤能力，为高表达HER2的乳腺癌及其它肿瘤的放射性靶向治疗研究提供依据。方法：1.收集体外培养的对数生长期的人乳腺癌细胞SKBR3和MDA
本研究由两部分组。第一部分目的：是探讨核因子-кB p50(NF-кB p50)和P16INK4A蛋白在HPV6/11阳性的尖锐湿疣(condyloma acuminatum，CA)组织中表达。方法：采用荧光定量聚合酶链反应(Fluorescence quantitative Polymerase Chain Reaction，FQ-PCR)检测确定低危组CA即HPV 6/11阳性、HPV 16/