【摘 要】
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目的:1、通过构建人乳腺癌MDA-MB-231细胞缺氧模型,检测缺氧对MDA-MB-231细胞干细胞标记物表达及自我更新能力、分化的情况,探讨缺氧对MDA-MB-231细胞“干性”调控作用。2、
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目的:1、通过构建人乳腺癌MDA-MB-231细胞缺氧模型,检测缺氧对MDA-MB-231细胞干细胞标记物表达及自我更新能力、分化的情况,探讨缺氧对MDA-MB-231细胞“干性”调控作用。2、初步探讨Notch信号在缺氧环境下对乳腺癌干细胞“干性”维持的作用方法:1、利用化学制剂二氯化钴(cobalt chloride Co Cl2)诱导,构建人乳腺癌MDA-MB-231细胞缺氧模型。通过Western Blot检测MDA-MB-231细胞中缺氧诱导因子(hypoxia-inducible factor-la,HIF-la)表达情况,验证细胞缺氧模型构建成功。2、缺氧对MDA-MB-231细胞“干性”调节作用:采用平板克隆实验检测细胞的自我更新能力,流式细胞仪检测缺氧对MDA-MB-231的CD44+CD24-/low型细胞的表达情况,免疫印迹试验(Western blot)检测干性标志物蛋白乙醛脱氢酶1(aldehyde dehydrogenase 1ALDH1)的表达情况。3、Notch信号通路在缺氧环境下对乳腺癌干细胞“干性”调节作用的初步研究:采用Western blot检测缺氧对乳腺癌干细胞Notch信号关键分子{Notch1、Hes-1、(Notch intercellular domain NICD)}表达的情况。结果:1、缺氧使MDA-MB-231细胞平板克隆能力明显增强、CD44+CD24-/low细胞比例增多、干性标记物蛋白表达增强。2、缺氧使Notch信号关键分子(Notch1、Hes-1、NICD)在MDA-MB-231细胞中表达增强。结论:1、缺氧可诱导乳腺癌MDA-MB-231干细胞“干性”维持或增强。2、Notch信号通路在缺氧对乳腺癌干细胞“干性”调节作用中发挥着重要作用。
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