纳米磁性功能微球在免疫分析中的应用及生物传感器的研究

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本论文共分六章。 第一章主要对有关磁性高分子微球的研究意义、结构与特点、现状进行了介绍,对磁性高分子微球的制备方法进行了系统地阐述,对磁性高分子微球在靶向药物、酶的固定化、细胞分离、免疫分析、核酸分离等方面的应用进行了全面的综述。 第二章是在总结现有的合成方法的基础上,采用分散聚合法,制备纳米磁性羧基微球和磁性氨基微球,对合成条件进行了优化,提出了纳米磁性功能微球的最佳合成条件。并对纳米功能磁性微球的性能进行了表征,如粒径大小和分布、磁化性能和表面官能团的定性检测以及结合生化物质的荧光定性试验。实验表明,所制得的微球具有超顺磁性,粒径较均匀,能有效结合生化物质,符合生化分析的要求。 第三章是将纳米磁性功能微球应用于免疫分析的研究。首先将纳米磁性功能微球与酶联免疫伏安法相结合测定抗原的研究.采用化学键合法将抗体固化磁性微球表面,捕获抗原和酶标二抗,磁分离后加入底物,生成的电活性物用示差脉冲伏安法测定。该法具有与抗体结合强度高,反应时间短,分离效率高、灵敏度高等特点,检测限达到0.06ng/mL,灵敏度大大高于目前临床采用的酶联免疫吸附法,另一种方法是将电活性物标记在二抗上,然后用化学键合法将抗体固化磁性微球表面,捕获抗原和电活性物标记二抗,在外加磁场作用下,磁性免疫微球吸附在金膜电极表面,直接用电化学法进行测定。该法具有灵敏、简单、快速、无需加底物便可直接测定等特点,另外由于纳米磁性微球的超顺磁性,当撤去外加磁场,磁性微球立即分散到溶液中,电极表面立即更新,非常适用于免疫分析的在线检测。 第四章是将纳米磁性功能微球与电化学石英晶体微天平相结合应用于免疫分析的研究。首先是设计了一种新的质量放大系统检测超痕量免疫活性分子。将纳米磁性功能微球表面修饰上二抗,然后和溶液中的抗原一起结合到石英晶振电极表面,由于磁性微球相对于抗体分子的质量大得多,导致测定的灵敏度得以极大地提高。
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