基于TOE法辽宁产龙胆药材栽培与野生品品质比较及叶绿体全基因组测定

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:danaxiao99
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:辽宁省为龙胆药材的道地产区,但由于植被的破坏及人类的过度采挖,野生龙胆资源日益减少。本实验以辽宁省不同产地野生与栽培龙胆药材为研究对象,采用TOE思路对野生及栽培龙胆八种化学成分的含量及生长指数进行全面比较,同时对龙胆进行叶绿体全基因组测定。从宏观到微观的角度对龙胆的药材质量进行较为全面的评价,同时可为栽培龙胆替代野生龙胆药材提供理论依据,为栽培龙胆药材提供科学指导。材料与方法:1材料:本课题实验材料采集于辽宁省9个不同野生或栽培产地及各产地不同基地的龙胆草共20批(辽宁省抚顺市清原县、抚顺市新宾县、本溪市桓仁县、丹东市宽甸县、大连市庄河市、鞍山市岫岩县、营口市盖州市、铁岭市、丹东市),药用部位为其根及根茎。经辽宁中医药大学尹海波教授鉴定为龙胆Gentiana scabra Bunge。2方法:2.1采用直尺、游标卡尺直接测量及色差仪测定法法进行生长指标及药材粉末色度的测定并对药材进行拍照保存,从外观性状的角度对辽宁省不同产地野生与栽培龙胆进行差异比较。2.2采用紫外分光光度法分别对龙胆药材中黄酮及多糖的含量进行测定,采用显著性差异检验法(LSD法)分析结果。2.3采用高效液相色谱法测定不同野生与栽培产地龙胆草药材中裂环环烯醚萜苷类,即龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷以及苦龙胆酯苷的含量,综合评价龙胆药材质量。2.4采用高效液相色谱法建立不同产地野生及栽培龙胆的指纹图谱。2.5采用高通量测序法测定龙胆的叶绿体全基因组。结果:1.外观性状对满足正态分布的平均根粗、平均须根数、L、a、b、E值进行独立样本t检验的结果如下:平均根粗P=0.427>0.05,野生品与栽培品的平均根粗的差异不具备统计学意义;平均须根数P=0.074>0.05,野生品与栽培品的平均须根数差异不具备统计学意义;L值P=0.011<0.05,故可认为野生品与栽培品的L值不等;a值P=0.62>0.05,野生品与栽培品的a值差异不具备统计学意义;b值P=0.06>0.05,野生品与栽培品的b值差异不具备统计学意义;E值P=0.01<0.05,可认为野生品与栽培龙胆的E值具显著性差异,具有统计学意义。2.化学成分2.1多糖:野生品与栽培品多糖含量正态性检验的统计量分别为0.914、0.870,P值分别为0.343、0.065,均>0.05,满足正态分布;四种Levene统计量分别为4.461、4.073、4.073、4.517,均>0.05,方差齐性。独立样本t检验P=0.318>0.05,野生品与栽培品的多糖含量差异无统计学意义。2.2五种环烯醚萜苷类:除了马钱苷酸与苦龙胆酯苷外,龙胆苦苷、獐牙菜苦苷和獐牙菜苷在野生与栽培龙胆间均无显著性差异,其中马钱苷酸与龙胆药材的L值显著相关,马前苷酸含量越高,药材的明亮度越高。2.3黄酮:野生品与栽培品黄酮含量正态性检验的统计量分别为0.825、0.932,P值分别为0.282、0.087,均>0.05,满足正态分布;四种Levene统计量分别为3.285、3.453、4.073、3.986,均>0.05,方差齐性。独立样本t检验P=0.031<0.05,野生品与栽培品的黄酮含量差异具有统计学意义。2.4齐墩果酸:野生品与栽培品在齐墩果酸含量上由于部分未达到检测限,样本数量较小,进行数理分析无统计学意义,但通过含量测定的结果看,栽培品龙胆齐墩果酸未达到定量限的比例为15.38%,野生品未达到定量限的比例为66.67%,因此野生品的齐墩果酸含量显著小于栽培品的含量。3.叶绿体全基因组分析:龙胆叶绿体基因组CP序列全长149,192 bp,总GC含量为37.61%,其中SSC(17,269bp)和LSC(81,353 bp)分别由4个典型结构组成,组成一个单独的IR(25,285 bp)。龙胆CP基因组编码125个独特基因,其中蛋白质编码基因84个,t RNA基因38个,rRNA基因4个,IR区44个拷贝。结论:一、外观性状1.数值分析可发现:野生龙胆药材比栽培龙胆药材更白,横环纹所占比例更大,而其他指标上并无差异。2.用肉眼观察可发现:野生龙胆药材形态较为饱满,颜色偏黄白色,多数具有主根,干燥后须根较为分散;而栽培龙胆药材须根较为皱缩,颜色偏红棕色,不具主根,干燥后须根聚集为一团。3.龙胆药材的马钱苷酸含量与颜色具有相关性,提示马钱苷酸含量越高,龙胆药材颜色可能越白。二、化学成分1.指纹图谱相似度评价结果与HPLC指纹图谱分析表明野生龙胆、人工栽培龙胆及对照药材化学指纹图谱共有16个共有峰。经对照品指认,指认出共有峰5个,分别为:马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷和苦龙胆酯苷,经相似度计算大部分样品相似度>0.9,提示野生品与栽培品相似度较高。2.环烯醚萜苷类:野生品马钱苷酸含量显著性大于栽培品,而野生品苦龙胆酯苷含量小于栽培品。而龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷的含量无差异。3.多糖含量:野生品与栽培品多糖含量无差异。4.黄酮含量:野生品黄酮含量小于栽培品。5.三萜类:龙胆野生品的齐墩果酸含量显著小于栽培品的含量。三、叶绿体全基因组测序结果龙胆叶绿体基因组CP序列全长149,192 bp,总GC含量为37.61%,其中SSC(17,269bp)和LSC(81,353 bp)分别由4个典型结构组成,组成一个单独的IR(25,285 bp)。龙胆CP基因组编码125个独特基因,其中蛋白质编码基因84个,t RNA基因38个,rRNA基因4个,IR区44个拷贝。一个含有两个内含子的基因:TRNF-AAA,trn Y-ATA,trn DATC,PSBA,atp F,Trni-TAT,trn N-ATT,rpo C 1,rpl2,ycf 2,ycf 15,ndh B,NDHA,ycf 1,rps 12.
其他文献
育苗移栽作为作物生产过程中的关键环节,对减少病虫害、提高秧苗成活率和节本增效方面具有重要作用。近年来,随着育苗移栽技术的不断深入研究,国内对移栽机械的需求显著提高
永磁同步电机具有功率密度大、体积小、效率高、调速性能好等优势,在国民生产各部门中担任动力提供、运输拖动、精密控制等重要角色。随着社会发展,各种自动化、智能化家居电
DNA凝聚及电荷逆转在生命科学、高分子物理、医学应用等领域中发挥着重要作用。在溶液中,DNA的凝聚依赖于溶液中抗衡离子的化合价,要引起DNA凝聚通常需要化合价大于等于三的阳离子。然而,细胞中最常见的小型抗衡离子,如Na+,K+,Ca2+和Mg2+等小于三的金属阳离子,它们在一般情况下不能使DNA凝聚。我们发现通过改变溶液的pH值,能够使二价金属阳离子导致DNA发生凝聚。我们通过单分子磁镊(MT)实
传统钢结构在地震作用下,其梁柱连接节点处易发生脆性破坏,且在震后修复成本较高。为解决此问题,有关研究人员以将塑性铰转移至节点以外的理念,设计了各种类型的新型钢框架梁
随着经济的急速发展与人民物质需求的快速提高,导致微电网负荷类型不断增多,负荷功率在不断增大,大功率负荷的数量在大幅度增长,日负荷的变化幅度也在逐渐增大,日负荷的峰谷
在哲学发展史上,元代理学可以说是宋代理学向明代心学转变的一个过渡阶段,在宋明理学形成与发展过程中,元代理学家对于理学思想的义理发挥并无突破性创新,其最大特点是“和会朱陆”,而刘基生活在元末明初之际,于是汇合朱陆、赓续理学便成为其学术理想。刘基的理学思想较好地体现了理学在元末明初的发展特征,同时又不乏有独到见解,这主要表现在理气论、心性论和工夫论等等方面:在理气论上,刘基将“理”作为其理学思想的最高
当今社会,伴随着工业化的高速发展和日益频繁的人类活动,环境污染越来越严重,能源危机和温室效应成为人们面临和亟待解决的重大问题。光能作为清洁能源的一种,引起了人们广泛的关注。通过光催化反应,可以有效地完成从光能到化学能的转化。g-C3N4作为一种新型无金属光催化剂,得到了学者们的广泛关注。但该催化剂自身存在许多缺陷,例如比表面积较低、可见光吸收边(460nm)相对较窄、光催化氧化能力较弱以及光生电子
本论文介绍了区块链的基本原理,重点是其在教育领域的潜在应用。本论文解释了这项新技术如何既可以重塑制度规范,又可以使学习者增强对信息安全的重视。提出了主要概念,回顾了包括教育在内的不同研究领域的区块链技术和智能合约应用文献。本论文的创新点是:a)根据当前技术发展和现状,提出在教育环境中应用区块链的方案,尽管基于区块链的产品在教育中的应用仍处于起步阶段;b)在对包含各种敏感数据的大学网络的安全性保证的
多花水仙(Narcissus tazetta var.chinensis)为石蒜科水仙属多年生草本球根类花卉,鳞茎肥硕,叶姿秀美,花香清雅,是福建省特色花卉,中国十大名花之一,具有极高的观赏和经济价
新时代是承前启后、继往开来、在新的历史条件下努力夺取中国特色社会主义伟大的胜利的时代,是我国高等院校和教育发展的时代,是社会涌现更多高质量的人才的时代。政治意识是“四个意识”之首,是最重要、最根本、最关键的意识。当前,我国正处在迎接建党一百周年和全面建成小康社会决胜阶段,在这种关键时刻,不坚定政治方向和立场,不提高正确的政治意识,就可能会迷失方向,就可能会造成严重问题。只有提高政治意识,旗帜鲜明讲