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目的:基于谱效相关分析方法,结合“谱”与“效”的研究,阐明青翘与老翘抗炎及保肝作用的物质基础,并依据两者差异药效物质特点,为探索青翘与老翘质控研究的新思路奠定基础。方法:1.采用高效液相色谱法分别建立连翘抗炎及保肝作用活性部位的HPLC指纹图谱,并对各部位指纹图谱共有峰进行提取,得到共有峰峰面积信息。2.采用灰色关联和双变量相关分析两种方法,对青翘不同极性部位抗炎活性的谱效相关性进行研究,找出对药效贡献较大的色谱峰,并通过对照品指认,初步明确其成分信息。3.以CCl4肝损伤大鼠模型血清中ALT、AST指标及组织病理形态比较并确定青翘与老翘的保肝作用及其活性部位,其后开展多批次保肝活性部位的药效实验。4.采用偏最小二乘回归分析方法,对青翘与老翘保肝活性部位的谱效相关性进行研究,得到对保肝药效贡献较大的色谱峰,并通过对照品指认,初步明确其成分信息。结果:1.青翘抗炎活性部位HPLC指纹图谱共有峰结果:青翘各极性部位有31个共有峰,水提物总部位有27个共有峰,乙酸乙酯部位有26个共有峰,正丁醇部位有19个共有峰,水层部位有12个共有峰。连翘保肝活性部位HPLC指纹图谱共有峰结果:青翘与老翘水提物部位有21个共有峰,Q-1有18个共有峰,Q-2有14个共有峰,Q-3有19个共有峰,Q-4有17个共有峰,L-1有14个共有峰,L-2有9个共有峰,L-3有5个共有峰,L-4有7个共有峰。2.青翘抗炎作用的谱效相关分析结果:经灰色关联分析,得出7个对药效贡献较大的峰,分别为23,25,31,29,24,26,30号峰。经双变量相关分析,显示23号峰含量变化与TNF-α呈极显著负相关(P<0.01);18,13号峰含量变化与IL-6呈极显著和显著性负相关(P<0.01,P<0.05);22峰含量变化与IL-1β呈极显著性负相关(P<0.01);7,13和6号等峰含量变化与IL-1β呈显著负相关(P<0.05)。即这些色谱峰所代表的化学成分含量越高,降低TNF-α,IL-6及IL-1β的效果越显著,抗炎效果越好。3.连翘保肝活性部位筛选结果:与模型组相比,青翘水提物、老翘水提物和老翘乙酸乙酯组提取物均能显著降低ALT活性(P<0.05);青翘水提物、老翘水提物和老翘正丁醇组均能显著降低AST活性(P<0.01,P<0.05)。肝脏组织病理形态学观察结果显示,与模型组比较,Q-1组到Q-4组、L-1组到L-4组病变程度均有不同程度的减轻。4.青翘与老翘水提物保肝作用的偏最小二乘回归分析结果:由ALT的VIP图显示,对药效贡献较大的峰依次为:11、3、13、9、6、18、19、5和21号峰。通过标准化回归系数图可以看出,大部分峰都与ALT呈负相关,即与保肝作用呈正相关,随着它们含量的增加,抗肝损伤的能力也将增强。由AST的VIP图可知,对药效贡献较大的峰依次为:11、6、3、9、19、21、5、2、13、16和18号峰。由标准化回归系数图可以看出,3、21、19、5、6、2、18和13号峰都与AST呈负相关,即与保肝作用正相关,随着它们含量的增加,抗肝损伤的能力将会增强。由上述结果可知,与青翘抗炎作用相关性最大(关联度和相关系数绝对值最大)的峰为:23(连翘苷),13(未知),25(槲皮素)和31号峰(连翘脂素)等。与连翘保肝作用相关性最大的峰可能为:3(未知)、21(连翘脂素)、19(槲皮素)、5(未知)、6(未知)、18(连翘苷)和13号峰(松脂素-β-D-葡萄糖苷)等。结论:青翘发挥抗炎作用的活性部位为乙酸乙酯部位,主要物质基础可能为连翘苷、槲皮素和连翘脂素等中等极性的成分;而青翘与老翘水提物是发挥保肝作用的活性部位,物质基础除了包括连翘脂素、槲皮素、连翘苷和松脂素-β-D-葡萄糖苷等成分外,还可能有其他极性较大的成分,提示保肝作用是连翘中多种不同极性成分共同作用的结果;可见连翘发挥抗炎和保肝作用的物质基础不同。