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目的:了解安徽地区儿童志贺菌血清型分布情况、对抗菌药物的耐药情况和毒力基因,分析志贺菌携带毒力基因与抗药性之间的联系。材料与方法:材料:研究样本为安徽省三十四家医院2010年到2015年间从儿童（五岁及以下）粪便中分离的345株志贺菌。选用大肠杆菌ATCC25922作为药敏试验质控菌株,由安徽省细菌耐药中心保存。方法:1.对2010年到2015年间儿童（五岁及以下）粪便中分离的345株志贺菌,采用常规生化和VITKE-2 Compact全自动微生物分析系统进行细菌的血清型鉴定。2.选择琼脂稀释法检测345株志贺氏菌对18种抗菌药物的最低抑菌浓度（Minimal inhibitory concentration,MIC）。药敏试验的依据是美国临床和实验室标准协会（Clinical Laboratory Standard Institute,CLSI）推荐的标准。3.检测16种志贺菌毒力基因（Virulence Genes,VRGs）:ial、ipa C、ipa B、ipa D、ipa A、ipa H、set、sen、sat、vir F、vir B、ics A、ics B、sig A、pic、sep A。用煮沸法提取志贺菌DNA,通过聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction,PCR）扩增16对引物,16对引物分成五组分别扩增（组1:ial、ipa H、set、vir F;组2:sen、sig A、pic、sep A;组3:ics A、ics B、vir B;组4:ipa C、ipa B、ipa D、ipa A;组5:sat）。反应体系为:预混料Taq酶聚合物12.5ul,每种引物的上游引物0.5ul,下游引物0.5ul,DNA模板2ul,去离子水（dd H2O）6.5ul-9.5ul（使最终反应体系为25ul）;反应条件为:95℃预变性15min;95℃变性45s,退火45s（退火温度:组1为57℃,组2为58℃,组3和组4为60℃,组5为59℃）,72℃延伸1min,经过35个循环;72℃延伸10min。取8ul PCR产物在1%琼脂糖凝胶上加样（含0.5ug/ml的EB）,电泳条件为电压150V电泳30分钟,通过凝胶成像系统观察并记录实验结果。结果:1.分析345株儿童志贺菌临床分离株发现,主要流行的血清亚型是福氏志贺菌（298株,86.4%）。宋内志贺菌是次在流行的血清亚型（44株,12.8%）。在福氏志贺菌中,源于安徽北部区域296株（99.3%）,中部区域2株（0.7%）。在宋内志贺菌中,源于安徽北部区域43株（97.7%）,中部区域1株（2.3%）。其中,相较于女童而言,福氏志贺菌的感染者多为男童（59.4%:40.6%,P<0.0001）。2.在福氏志贺菌中:耐药性从高到低的前几位分别为氨苄西林（98.3%）、萘啶酸（97%）、四环素（93.3%）、氯霉素（88.6%）和环丙沙星（80.2%）;敏感性从高到低的前几位分别阿米卡星（98.7%）、头孢西丁（94.6%）和哌拉西林/他唑巴坦（93.3%）。在宋内志贺菌中:所有菌株对氨苄西林和阿奇霉素全部耐药（100%）。其次为萘啶酸（97.7%）、庆大霉素（93.2%）、四环素（90.9%）和复方新诺明（88.6%）;所有菌株对阿米卡星全部敏感（100%）,其次为哌拉西林/他唑巴坦（97.7%）和亚胺培南（97.7%）。相比而言,福氏志贺菌对环丙沙星、氯霉素的抗药性比宋内志贺菌高;而宋内志贺菌对阿奇霉素、庆大霉素的抗药性比福氏志贺菌高。3.345株儿童志贺菌临床分离株携带16种毒力基因的情况:（1）在分离的298株福氏志贺菌中:入侵相关基因中ipa H基因检出频率最高,为298株（100%）,其次为ipa B基因296株（99.3%）,ipa C基因295株（99.0%）,ipa D基因295株（99.0%）,ipa A基因295株（99.0%）和ial基因288株（96.6%）;肠毒素基因中,set基因283株（95.0%）,sen基因278株（93.3%）;调控基因中,ics A基因296株（99.3%）,ics B和vir B基因检出频率相同,都为293株（98.3%）,vir F基因288株（96.6%）;SPATEs基因中,sig A基因280株（94.0%）,sat基因279株（93.6%）,pic基因269株（90.3%）,sep A基因267株（89.6%）。（2）在分离的44株宋内志贺菌中:入侵相关基因中,ipa H基因检出频率也是最高,为44株（100%）,其次为ipa B基因43株（97.7%）,ipa C基因42株（95.5%）,ipa D基因41株（93.2%）,ipa A基因41株（93.2%）,最后为ial基因34株（77.3%）;肠毒素基因中,sen基因39株（88.6%）,而set基因在此次研究中的宋内志贺菌分离株均未检测到;调控基因中,ics A基因43株（97.7%）,vir B和ics B基因均为42株（95.5%）,vir F基因34株（77.3%）;SPATEs基因中,sig A基因43株（97.7%）,而sat和pic及sep A基因在研究中的宋内志贺分离株中均未测出。结论:1.福氏志贺菌和宋内志贺菌是安徽省儿童志贺菌主要流行血清亚群。北部区域的儿童具有更高的细菌性痢疾感染风险。2.安徽省儿童临床分离志贺菌一般均为氨苄西林-萘啶酸-四环素的多重耐药株。其中,对于氟喹诺酮类抗菌药物,福氏志贺菌比宋内志贺菌具有更高的抗药性。3.毒力基因ial、ipaA、ipaC、ipaD、virB、virF、set、icsB、pic、sepA阳性福氏志贺菌比阴性福氏志贺菌对CHL、CIP的抗药性强;set阳性福氏志贺菌比阴性福氏志贺菌对CRO和CAZ的抗药性强;毒力基因ial、vir F、set、ics B、vir B、pic、sep A阴性福氏志贺菌对GEN和AZM的抗药性更强。毒力基因阳性福氏志贺菌和宋内志贺菌耐药率相似,但对CRO和CAZ的耐药率更高。4.志贺菌携带数个毒力基因与其抗药性有关。需更进一步分析其表达机制与志贺菌抗药性的遗传问题,由此可以更好的对志贺菌病的临床治疗做出指导。