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目的：慢性胰腺炎（CP）是以胰腺实质内腺泡和小管受到反复或持续性损害，引起腺泡和胰岛细胞萎缩或消失的病理学过程，而细胞凋亡与胰腺炎存在一定的相关性，凋亡程度与胰腺炎的病情严重程度呈负相关。研究表明，肿瘤坏死因子-α（TNFα）、转化生长因子-β（TGFβ）、Fas是参与细胞凋亡的重要因子。Fas和TNF分别与其相应受体FasL和TNFR-1结合，再结合胞内相应的死亡域并下传凋亡信号，激活下游的级联反应而触发凋亡。氧化苦参碱（OM）是一种从中药苦参中分离得到的生物碱，有研究表明OM具有明显的诱导细胞凋亡的作用。
本实验以Wistar大鼠为研究对象，观察Wistar大鼠CP模型的制备效果，并以OM进行治疗干预。对胰腺组织进行病理观察；应用透射电镜对胰腺腺泡细胞、胰岛细胞进行形态学进行观察；应用TVNEL技术对胰腺腺泡细胞、胰岛细胞进行细胞凋亡检测，计算凋亡指数：应用Western blot技术检测胰腺组织Fas含量变化；应用ELISA技术检测胰腺组织TNFα、TGFβ含量变化。结合前期研究及相关研究结果，探讨Fas、TNFα、TGFβ在CP中可能的作用机制及OM对此过程的影响及其可能机制，为CP治疗探索新途径，同时为OM的进一步研究、开发和应用提供实验依据。
方法：第一部分：雄性Wistar大鼠80只（220-250g）用随机数字表法分为阴性对照组（NC，n=16）和CP模型组（CP，n=64），CP模型组根据注射剂量的不同再分为4个小组（n=16）。CP模型组隔日给予腹腔注射一次二乙基硫代氨基甲酸盐（DDC），NC组给予生理盐水腹腔注射。各组实验动物按注射DDC的时间取4个不同时相点（6d，12d，24d，32d），再分为4个小组，每组4只。各组分别在预定的时间点采集颈动脉血液和胰腺等组织，大体观察大鼠，并采用全自动生化分析仪检测AMY，取胰腺组织HE和Masson染色制片，观察胰腺组织的病理学变化，对DDC造模做出评价。
第二部分：在第一步实验结果的基础上得出最佳的造模剂量，进行下步实验。雄性Wistar大鼠28只，随机分为7组（n=4），包括CP组，NC组和OMⅠ-Ⅴ组。CP组和OM每组注射等量的DDC，方法同第一部分实验。OMⅠ-Ⅴ组5组在制模时各组分别给予不同的OM注射量，OM自注射DDC的第一天起同时注射，每天一次。在注射30天后，采取动脉血和胰腺等组织，ELISA法检测HA、LN和PCⅢ，Western blot测定胰腺组织α-SMA蛋白含量检测并进行分析，得出OM治疗CP的最佳量效关系。
第三部分：在第一部分和第二部分实验结果的基础上进行实验。雄性Wistar大鼠32只（220-250g），随机分为4组（n=8），包括CP组，OM组，HM组和NC组。CP、OM和HM每组注射等量的DDC，方法同第一部分实验。CP模型制备后给予OM组腹腔注射进行治疗（剂量为第二部分的最佳剂量）；给予HM组地塞米松腹腔注射进行治疗，剂量100mg/kg。30d后手术取出胰腺组织，应用透射电镜对胰腺腺泡细胞、胰岛细胞进行形态学进行观察。应用TUNEL技术对胰腺腺泡细胞、胰岛细胞进行细胞凋亡检测，计算凋亡指数。应用Western blot技术检测胰腺组织Fas含量变化。应用ELISA技术检测胰腺组织TNFα、TGFβ含量变化。
所有实验图片用Image-Pro Plus Version5.0图像分析系统进行定量分析。应用SPSS12.0进行统计学分析，计数资料用x2检验，计量资料用t检验和方差分析。
结果：第一部分（1）AMY结果显示，CP各组在6d时间点与NC组相比显著升高（P<0.05），在12d时间点仅有CPⅠ和CPⅢ与NC组相比显著升高（P<0.05）。（2）观察并发症和死亡率，CP各组与CPⅠ相比较， CPⅡ、Ⅲ和Ⅳ组的尿失禁并发症较CPⅠ有统计学意义（P<0.05），CPⅣ出血较明显（P<0.05），各组在震颤方面无明显差别。CPⅢ和CPⅣ出现死亡，其死亡率两组无差别。（3）胰腺组织的胶原组织的面积百分比，在6d组中，除CPⅠ外各组与NC组均有明显增多（P<0.05），尤以CPⅢ为著（P<0.01），在12d，24d的增多更为明显，在32天中，因为CPⅣ全部死亡，无法比较，余者皆有统计学意义（P<0.01）。
第二部分：（1）血清学指标：HA、LN和PCⅢ的NC组均较其他各组为低（P<0.05），而CP组与OMⅠ组无显著性差异（P>0.05）。（2）胶原纤维面积百分比我们也可以看出，OM可以抑制纤维化的发展，OM各组除Ⅰ组外均较CP组有显著性差异（P<0.05）。（3）α-SMA的Western blot结果显示，α-SMA在CP时表达量上调，OM可以降低α-SMA的表达，OM在剂量50-400mg/kg之间α-SMA的表达无剂量依赖性，以100mg/kg为最佳剂量。
第三部分：（1）血清淀粉酶测定结果：CP，OM，HM各组较NC组相比显著升高（P<0.05）；CP组大鼠血清淀粉酶的含量显著高于OM组与HM组（P<0.05）。（2）TUNEL技术检测结果：OM组和HM组凋亡率显著高于CP组（P<0.05）。（3）Western blot技术检测胰腺组织Fas含量变化结果显示OM组与HM组Fas蛋白含量显著高于NC组（P<0.05）。（4）ELISA技术检测胰腺组织TNFα、TGFβ：OM组和HM组大鼠血浆 TNFα含量显著高于NC组（P<0.05），而OM组和HM组大鼠血浆TGFβ含量显著高于NC组（P<0.05），结果提示，TGFβ含量的升高可能与胰腺细胞的增殖有关，促进组织修复。
结论：（1）隔日一次腹腔注射700mg/kg DDC方法制备CP大鼠模型成功。（2）OM对大鼠CP的有一定的治疗作用，在剂量50-400mg/kg之间对α-SMA的表达无剂量依赖性，以100mg/kg为适合剂量。（3）实验证明OM具有明显的诱导胰腺细胞凋亡的作用，并且能明显改善胰腺炎病变程度。