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生长激素(Growth Hormone，GH)是由脊椎动物下丘脑分泌的单链多肽激素，鱼类生长激素参与鱼体的生长、发育和代谢等；胰岛素样生长因子(Insulin-like growthfactor I.IGF I)是一类多功能细胞增殖调控因子，由胰腺分泌合成，在细胞的分化、增殖、个体的生长发育中具有重要的促进作用。这两种因子鱼类体内天然含量极低，分离纯化比较困难，基因工程技术为生产大量廉价的鱼生长激素创造了条件。重组鱼类生长激素具有天然生长激素同样的功能，在养殖方面，多种鱼类生长激素制剂及饲料得到应用，因此，生产基因重组鱼生长激素在鱼类养殖方面具有重要的经济价值。本论文成功获得了红鳍笛鲷生长激素基因以及胰岛素样生长因子基因的全序列，实现了红鳍笛鲷生长激素(Lutjanus erythopterus GH)在毕赤酵母(Pichia pastoris)中的分泌表达，通过重组生长激素毕赤酵母投喂罗非鱼验证了重组生长激素的促鱼类生长作用。 (1)红鳍笛鲷GH基因和IGFⅠ基因的获得 在Gen Bank中下载相近种GH和IGFⅠ基因序列，在保守区设计两种基因的合适引物，PCR扩增后分别克隆测序获得GH和IGFⅠ部分序列，得到GH编码区序列467bp，IGF编码区部分序列506bp，采用特定接头，将模板3’和5’分别延长，将接头引物和所设计的引物配对进行槽式PCR扩增、克隆纯化最后测序得到它们的3’RACE和5’RACE序列。用Congtig Express进行拼接后得到这两个基因全序列，最后在线分析其基因组成。GH基因全长787bp，其中5’端非编码区长19bp，编码区长615bp，3’非编码区长153bp，提交至Gen Bank登录号为：JQ346228；IGFⅠ基因全长1132bp，其中5’端非编码区长134bp，编码区长558bp，3’非编码区长460bp，提交至Gen Bank登录号为：JN383435。 (2)红鳍笛鲷GH在毕赤酵母中的表达及重组毕赤酵母促生长作用 将红鳍笛鲷GH编码区cDNA克隆到分泌表达载体，构建重组表达质粒pPICZα-GH，转化毕赤酵母GS115菌株，YPDZ培养基筛选，PCR验证重组子，经培养和诱导表达，取培养基上清进行SDS-PAGE分析，结果表明，GH分泌至培养物中。诱导较佳条件为：甲醇浓度为0.5％，温度为30℃，pH值为6.0。用含有表达产物的未纯化培养物拌料连续投喂罗非鱼，25天的初步实验表明重组生长激素毕赤酵母混合培养物具有明显地促进罗非鱼生长的作用。