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【研究背景】：不孕不育症严重危害人类身心健康，男性生殖健康的问题已经受到国内外医学界的重点关注。精子发生障碍引起男性不育。大量的临床与实验研究资料表明，雄激素及其受体(AR)在精子发生过程中具有非常重要的作用。雄激素主要通过作用于睾丸支持细胞中的AR调节精子发生的过程。我们前期研究发现，细胞膜蛋白中有AR的表达，且睾酮可以快速诱导AR向细胞膜转运。 【目的】：雄激素主要通过作用于睾丸支持细胞中的雄激素受体（AR）调节精子发生的过程，但详细的分子机制尚未明了。本项目旨在探讨睾丸支持细胞中睾酮诱导胞浆AR向细胞膜转运的分子机理，进一步阐明雄激素非经典作用通路的作用原理。 【方法】：采用蛋白免疫印迹和细胞免疫荧光技术，检测AR在小鼠睾丸支持细胞（原代培养细胞或TM细胞系）细胞膜的定位或表达特征，以及睾酮刺激后胞浆和胞膜AR表达水平的差异；采用蛋白质免疫共沉淀、质谱检测和生物信息学分析等技术，筛选睾酮调控候选蛋白谱；采用蛋白质免疫印迹、蛋白质免疫共沉淀及shRNA技术验证质谱分析结果，并进一步探讨其参与AR快速转运的分子机制。 【结果】：蛋白免疫印迹和细胞免疫荧光检测结果显示，AR在TM4细胞膜表达，且生理浓度的睾酮可快速诱导AR向细胞膜转运。采用质谱及生物信息学分析技术，发现10个参与AR转运的候选蛋白。Caveolin-1与棕榈酸化后的AR结合，使AR锚定在细胞膜上。进一步的研究显示，VAPA与囊泡运输蛋白OSBP结合，介导AR在细胞内的转运；CSN6通过磷酸化信号通路调节AR的转运；Rab34通过调节激酶RAS的活性影响AR的转运。 【结论】：睾酮通过诱导AR棕榈酰化、与caveolin-1结合，促进AR向细胞膜转运；VAPA通过与囊泡运输蛋白OSBP结合，参与AR在细胞内的转运；CSN6通过调控磷酸化信号通路影响AR在细胞内的转运。Rab34通过影响激酶Ras的活性调控AR在细胞内的转运。