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膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤,术后高复发率为其显著特点。芹菜素(apigenin)具有多种药理活性,如降血压、镇静、抗菌以及雌激素样作用等,近年来由于发现其对多种肿瘤具有抑制作用,从而引起肿瘤学者的关注。本研究通过对膀胱癌细胞株BIU-87的体外实验,探讨芹菜素对膀胱癌细胞的作用效果及其机制,为保留膀胱患者术后预防复发及晚期膀胱癌病人的治疗探寻一种新的方法。第一部分芹菜素对膀胱癌BIU-87细胞体外增殖的影响目的:探讨芹菜素在体外对膀胱癌细胞株BIU-87增殖的影响。方法:MTT法测定不同时间不同浓度芹菜素作用后BIU-87细胞的生长抑制情况。结果:MTT法检测发现:药物的抑制作用随其浓度和时间的增加而增大,同一时间不同药物浓度各组之间以及同一药物浓度不同时间之间细胞抑制率均有显著差异(P﹤0.05)。结论:芹菜素在体外可明显抑制膀胱癌BIU-87细胞增殖,呈明显的剂量-效应、时间-效应关系。第二部分芹菜素诱导膀胱癌细胞株BIU-87凋亡及机制目的:探讨芹菜素对膀胱癌细胞株BIU-87体外诱导凋亡情况及其可能机制。方法:①流式细胞术检测细胞周期变化情况;②Annexin V-FITC /PI双染法流式细胞术观察芹菜素作用后细胞的凋亡情况;③RT-PCR检测Survivin mRNA表达的变化;④免疫细胞化学SP法检测Survivin和Caspase-3蛋白表达的变化。结果:①2.03μmol/L芹菜素作用72h后,流式细胞仪检测发现芹菜素可使BIU-87细胞阻滞在G2/M期,并出现明显的凋亡峰。②流式细胞术双染法检测细胞凋亡显示细胞凋亡率显著增加(P﹤0.05)。③RT-PCR检测发现芹菜素可使BIU-87细胞Survivin mRNA表达显著减少(P﹤0.05),④免疫细胞化学SP法检测显示Survivin蛋白表达亦显著减少(P﹤0.05),Caspase-3蛋白表达则明显增加(P﹤0.01)。结论:芹菜素可诱导膀胱癌BIU-87细胞发生凋亡,芹菜素诱导细胞发生凋亡的生物学效应可能与细胞周期阻滞、Survivin的表达下降、Caspase-3的表达上升有关。