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粘帚霉(Clonostachys spp.)是一类分布广泛的土壤习居菌,也是目前己知的颇具应用前景的植物生防因子之一。粉红粘帚霉(C. rosea)67-1菌株是由中国农业科学院植物保所土传病害实验室分离筛选得到的一株高效植病生防菌株,对多种植物病原菌都具有很强的寄生能力。然而,从自然土壤中分离筛选的野生菌株往往由于生长速率、产孢量、寄生能力和抗逆性等原因,限制了生防菌株抗病能力的提高,从而影响了田间实际应用效果和商品化生产,为使生防菌株的生防效果得到提高,有必要对菌株进行遗传改良以及外源的功能基因转化。本论文采用限制性内切酶介导的PEG转化法将含哈茨木霉(Trichoderma harzianum)内切几丁质酶基因ThEn42的质粒PxxSl转入粉红粘帚霉67-1中。对其生物学测定表明,其中7株转化子产孢量明显增加,6株转化子生长量显著提高。酶学研究表明,转入几丁质酶基因能够有效提高粉红粘帚霉67-1菌株几丁质酶表达水平,1/10左右的转化子几丁质酶活性显著提高。对峙实验发现1/5转化子对核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)抑制效果显著增强。筛选出具有较强生防潜力的优良转化子TC-8、TC-64、TC-298、TC-406、TC-514,对其进行抗大豆菌核病防效实验的测定,结果表明TC-8、TC-64、C-298转化子其防病效果明显优于67-1原始菌株和化学农药。通过Real-time PCR方法检测转化子与野生型菌株ThEn42基因在转录水平上的差异,其中转化子TC-64转录水平是野生型的9倍。本文还通过原生质体转化法制备粉红粘帚霉67-1转8-3基因的转化子,潮霉素抗性平板初筛及PCR复筛,共获得24个转化子。对其生物学测定表明,其中1株转化子产孢量明显增加,2株转化子生长量显著提高,对峙实验发现1/4的转化子对核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)抑制效果显著增强,但是否能够增强菌株的实际生防效果,还需要进一步的实验来验证。