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目的:
观察转化生长因子-β1(transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1)及结缔组织生长因子(connectivetissuegrowthfactor,CTGF)在大鼠胆管缺血性损伤修复过程中的表达和分布,探讨良性胆管狭窄形成机制。
方法:
100只SPF级SD大鼠随机分为对照组及实验组,实验组根据术后处理时间不同分为4个亚组(术后1、3、5、8周处理组),每组20只。实验组用2枚显微血管夹(宽0.2cm)夹闭一段长约0.4cm的胆总管90分钟,对照组仅暴露胆管未夹闭。对照组于术后1周取胆总管组织,实验组于术后1、3、5、8周取夹闭处中间胆总管组织石蜡包埋,行HE及VG染色,观察其病理改变;两组分别取肝左外叶组织行HE染色;免疫组化技术检测两组胆管组织中TGF-β1、CTGF的阳性表达部位,并采用病理图像分析系统计算阳性细胞数。
SPSS16.0软件作统计学处理,TGF-β1和CTGF阳性表达细胞的数量相关性采用Spearman秩相关分析,P<0.05为差异有统计学意义。
结果:
实验组夹闭处中间胆管管腔变小或闭塞,胆管粘膜坏死脱落,管壁纤维化增厚,钳夹部位以上胆管明显扩张;肝脏细胞充血水肿,胆汁淤积。对照组胆管组织无明显变化,肝脏组织正常。
实验组TGF-β1阳性染色呈黄色或棕黄色,主要表达于胆总管肉芽组织、成纤维细胞、巨噬细胞及血管内皮细胞胞浆和细胞膜;CTGF阳性细胞呈黄色或棕黄色染色,表达于胆管上皮细胞、血管内皮细胞、增生的成纤维细胞及炎性细胞的细胞浆,以成纤维细胞表达为主;胆管胶原纤维增粗,结构紊乱。
对照组TGF-β1和CTGF呈阴性或弱阳性表达,胆管胶原纤维较细,结构正常。
两组胆总管组织TGF-β1及CTGF阳性表达细胞数量比较,差异有显著统计学意义(P<0.01);实验组组间TGF-β1及CTGF阳性表达细胞数量比较,差异无统计学意义(P>0.05);Spearman相关分析,实验组TGF-β1和CTGF阳性细胞表达数量呈正相关(r=0.246,P<0.05)。
结论:
TGF-β1和CTGF具有协同作用,两者在胆管组织中的高表达引起成纤维细胞增殖旺盛、细胞外基质过度沉积、瘢痕增生,是导致良性胆道狭窄的重要因素。