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目的:热应激严重损害猪睾丸精子发生和精液品质,但是其分子机制目前还不清楚。人工隐睾症模型或局部处理实验动物大鼠、小鼠、猴子的睾丸,可引起精子发生受损,精液的品质下降。热应激对细胞凋亡调节蛋白Bak和Bclw在猪睾丸表达是否有影响,目前还没有研究报道。本研究的目的是探索热应激是否通过影响猪睾丸细胞凋亡调节蛋白Bak和Bclw的表达,进而影响猪精液的品质。方法:本研究构建了热应激损伤猪精子发生的模型。性成熟长白公猪,经环境热应激处理(每天置37～40℃的猪舍环境3 h,实验处理时间为7 d)或睾丸局部42℃热刺激处理1 h。对照组饲养在20～27℃的猪舍环境。取材到的睾丸组织,部分冻存于液氮当中用于蛋白质的提取;部分固定于Bouin氏固定液当中,用于制备石蜡切片,用免疫组织化学方法检测凋亡调节蛋白Bak和Bclw表达及定位的变化。结果:1热应激处理对猪阴囊和睾丸温度的影响用红外热像仪测定各组猪阴囊和睾丸的温度,发现当种公猪处于室温环境(20-27 C)时,阴囊和睾丸的温度低于体温3-5C(32.0-34.6C),而当猪舍环境温度接近或超过体温时(37-40C),猪阴囊和睾丸的温度可接近体温(32.5-37.5 C)。2热应激处理对精液品质的影响环境热应激处理导致精液的品质下降,与对照组相比,热处理组精子活力降低、畸形率升高、顶体完整性破坏程度增加。3热应激对凋亡调节蛋白表达的影响Western blotting结果显示,与对照组相比,环境加热组和局部加热组Bclw和Bak蛋白水平均显著升高;其中,Bclw在环境加热组表达水平最高,Bak在局部加热组表达水平最高。4免疫组织化学定位研究显示:Bclw和Bak在猪睾丸中的免疫反应阳性物共同定位于间质细胞、支持细胞和各发育阶段生精细胞的细胞质,热应激导致Bclw在精母细胞和减数分裂以后的生精细胞表达量增加;Bak在精原细胞、精母细胞、支持细胞和减数分裂以后的生精细胞阳性着色加深。结论:环境高温热应激和睾丸局部热处理均诱导猪睾丸生殖细胞凋亡调节蛋白Bclw和Bak表达量升高,提示Bclw和Bak的表达变化可能与热应激导致的猪精液品质下降存在一定关联。