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类二十烷酸（eicosanoids）,是一大类由二十碳多不饱和脂肪酸氧化产生的具有生物活性的不饱和脂肪酸,广泛存在于体液和组织中,是重要的炎症因子,在体内调节众多生理和病理过程。类二十烷酸在生物体内种类众多,含量较低,并且存在大量同分异构体,故生物体内类二十烷酸分离和分析具有较大的挑战。炎性微环境在乳腺癌的发生、发展中起着重要作用。类二十烷酸作为重要的炎症因子,也参与促进或者抑制乳腺癌的发生发展过程。实验室前期研究筛选发现,木香烃内酯,去氢木香烃内酯,木犀草素和羽扇豆醇均具有抗乳腺癌活性,但其抗乳腺活性的作用机制尚不明确。膳食中多不饱和脂肪酸,特别是一定比例的omega-3/omega-6多不饱和脂肪酸的摄入能够降低乳腺癌的患病风险,但对于omega-3和omega-6多不饱和脂肪酸抑制或者促进乳腺癌的作用及其作用机制目前仍存在争议。本研究将基于超高效液相色谱-三重四级杆质谱平台,建立多种类二十烷酸的快速准确的定量分析方法;并采用目标类二十烷酸组学等技术,研究木香、蒲公英中活性成分和多不饱和脂肪酸影响乳腺癌MCF-7细胞中类二十烷酸的代谢变化,阐述中药活性成分和多不饱和脂肪酸抗乳腺癌活性作用的机制。论文的主要内容包括:1、优化三重四级杆质谱条件和液相色谱条件（色谱柱,流动相体系及柱温）,得到32种类二十烷酸标准品的MRM离子对和DP,CE等质谱参数;选择BEH Shield RP18色谱柱进行类二十烷酸液相分离,流动相A相为乙腈/水/乙酸（60/40/0.02,v/v）,流动相B相为乙腈/异丙醇（50/50,v/v）,柱温40℃。32种类二十烷酸在4.5分钟内达到较好的分离,且具有较优的峰形。2、方法学验证考察了线性范围,定量下限,准确度,日内和日间精密度,短期稳定性,提取回收率和基质效应。结果表明该方法线性范围宽且线性良好,灵敏度高,稳定可靠,具有良好的准确度和精密度,提取回收率和基质效应均符合生物样品的分析要求。3.基于建立的UPLC-MS/MS分析方法,我们对抗乳腺癌活性成分干预下MCF-7细胞中类二十烷酸代谢物进行组学分析。向MCF-7培养基中加入10μg/mL木香烃内酯Cos,去氢木香烃内酯Deh,羽扇豆醇Lup,木犀草素Lut,紫杉醇PTX和等体积空白甲醇分别孵育4 h,8 h,12 h,24 h后,取MCF-7细胞培养基上清液中进行类二十烷酸定量分析,通过多维统计分析和t检验分析Cos,Deh,Lup和Lut对MCF-7细胞类二十烷酸代谢的影响,发现四种活性成分对MCF-7细胞中类二十烷酸代谢的影响与处理时间呈一定相关性。本研究也对Cos,Deh,Lup和Lut抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖的作用机制进行了初步探索,根据四种活性成分组中PGE2和PGD2含量变化,推测Cos,Deh,Lup,Lut可以诱导15-PGDH的表达,从而抑制乳腺癌细胞的增殖。4、向MCF-7培养基中加入2 mM ARA,EPA,DHA和等体积空白无水乙醇处理,孵育24 h后,取MCF-7细胞培养基上清液中进行类二十烷酸定量分析,通过多维统计分析和t检验分析ARA,EPA和DHA对类二十烷酸含量的影响,发现ARA,EPA和DHA均能对MCF-7细胞的代谢产生影响。本研究也对ARA,EPA,DHA对MCF-7细胞增殖的影响进行了初步探索,ARA通过促进乳腺癌MCF-7细胞中前列腺素,白三烯等的生成,从而促进乳腺癌细胞的增殖,而EPA和DHA通过与ARA竞争,影响前列腺素,白三烯等的生成,从而抑制乳腺癌细胞的增殖,诱导MCF-7细胞凋亡。