【摘 要】
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[目的]: 1、提取、培养和鉴定兔膝关节软骨细胞。 2、探讨聚乙烯醇/明胶复合材料与软骨细胞的生物相容性。 [方法]: 1、采用酶消化法提取兔膝关节软骨细胞,倒置显
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[目的]: 1、提取、培养和鉴定兔膝关节软骨细胞。 2、探讨聚乙烯醇/明胶复合材料与软骨细胞的生物相容性。 [方法]: 1、采用酶消化法提取兔膝关节软骨细胞,倒置显微镜每日观察细胞形态及活力,待细胞传代至第三代时通过甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组化染色方法鉴定软骨细胞。 2、第三代软骨细胞与材料复合培养,2周、4周时进行光镜观察、电镜分析、组织切片HE染色、Ⅱ型胶原免疫组化、细胞生长曲线与MTT比色法,检测复合材料与软骨细胞的生物相容性。 [结果]: 1、采用酶消化法提取、培养的第三代兔膝关节软骨细胞,细胞生长旺盛,甲苯胺蓝染色结果细胞外基质异染呈紫红色,Ⅱ型胶原免疫组化方法染色细胞浆染色呈黄褐色,经鉴定酶消化法提取、培养的细胞为软骨细胞。 2、聚乙烯醇/明胶复合材料与软骨细胞复合24小时后细胞开始在材料表面贴壁生长,2周时细胞生长曲线、MTT检测结果显示材料内细胞生长趋势与对照组相同。组织切片HE染色、电子显微镜、Ⅱ型胶原免疫组化组织切片结果显示材料表面及内部细胞开始分泌Ⅱ型胶原基质,覆盖材料。4周时细胞生长曲线、MTT检测结果显示材料表面及内部细胞生长趋势与对照组相同。组织切片HE染色、电子显微镜、Ⅱ型胶原免疫组化组织切片结果显示材料内部见大量细胞,并分泌大量胶原基质,逐渐填补材料孔隙。 [结论]: 聚乙烯醇/明胶材料能为软骨细胞提供生长所需的结构支撑,适宜软骨细胞生长具有优良的生物相容性。
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