肾上腺髓质素及其抑制剂对胰腺癌细胞侵袭力的影响

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:zhouqin1983
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目的:探讨外源性的肾上腺髓质素(ADM)及其特异性受体抑制剂(ADM22-52)对人胰腺癌细胞系Miapaca-2侵袭和迁移能力的影响及其作用机制,并可能为胰腺癌的临床治疗提供新的思路。方法:①培养人胰腺癌细胞系(Miapaca-2),采用PCR定性检测细胞中ADM及肾上腺髓质素特异性受体(ADMR) mRNA的表达,免疫细胞化学法(ICC)检测细胞中ADM及ADMR蛋白表达情况。②使用外源性ADM及ADM22-52干预Miapaca-2胰腺癌细胞,实验随机分为空白对照组、ADM10-7mol/L干预组和ADM10-7mol/L+ADM22-5210-6mol/L干预组。干预细胞48h后,采用Transwell侵袭迁移实验检测各组中Miapaca-2胰腺癌细胞侵袭和迁移能力的变化;采用实时荧光定量PCR技术法检测细胞中MMP-2和VEGFmRNA的表达变化;采用ICC法检测细胞中MMP-2和VEGF蛋白的表达变化。结果:①Miapaca-2胰腺癌细胞系中有ADM及ADMR mRNA表达,ICC染色Miapaca-2胰腺癌细胞中ADM及ADM蛋白呈阳性染色。②ADM10-7mol/L干预组Miapaca-2胰腺癌细胞的侵袭和迁移能力均高于空白对照组(P<0.05)和ADM10-7mol/L+ADM22-5210-6mol/L干预组(P<0.05)。而ADM+ADM22-52干预组与空白对照组比较之间无统计学差异(P>0.05)。③ADM10-7mol/L干预组Miapaca-2胰腺癌细胞中的MMP-2和VEGFmRNA的表达水平均高于空白对照组(P<0.05)和ADM10-7mol/L+ADM22-5210-6mol/L干预组(P<0.05)。而ADM+ADM22-52干预组与空白对照组比较无统计学差异(P>0.05)。④免疫细胞化学染色ADM10-7mol/L干预组Miapaca-2胰腺癌细胞中MMP-2和VEGF蛋白呈强阳性染色,而空白对照组和ADM10-7mol/L+ADM22-5210-6mol/L干预组细胞中MMP-2和VEGF蛋白呈阳性染色。结果评分显示ADM10-7mol/L干预组细胞中的MMP-2和VEGF的蛋白表达水平均高于空白对照组(P<0.05)和ADM10-7mol/L+ADM22-5210-6mol/L干预组(P<0.05)。而ADM+ADM22-52干预组与空白对照组比较无统计学差异(P>0.05)。结论:1. Miapaca-2胰腺癌细胞mRNA水平和蛋白水平上都可表达ADM及ADMR。2.外源性ADM可增强Miapaca-2胰腺癌细胞的侵袭和迁移能力,其特异性受体抑制剂ADM22-52可阻断ADM的作用,进而证明ADM的作用至少部分是由ADMR介导的。3.外源性ADM可诱导Miapaca-2胰腺癌细胞中MMP-2和VEGFmRNA水平及蛋白表达水平升高。ADM特异性受体抑制剂ADM22-52可有效阻断ADM诱导MMP-2和VEGF在Miapaca-2胰腺癌细胞中表达升高的作用。进而证明ADM通过诱导MMP-2和VEGF表达升高促进Miapaca-2胰腺癌细胞的侵袭和迁移能力。
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