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目的肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)起病隐匿、恶性程度高,预后极差,与肝细胞癌(简称肝癌)临床病理特征和预后有关的因素仍在不断探索中。越来越多的证据表明叉形头转录因子O亚型(Forkheadbox O,FOXO)在肿瘤进展和预后中起到重要的作用,然而,FOXO基因对肝癌的临床病理特征和预后是否也存在作用,目前未见有报道。为此,本研究从FOX 基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)出发,探讨FOXO基因与肝细胞癌临床病理特征和预后的关联性,并验证阳性位点对相应的FOXO蛋白表达的影响,为肝细胞癌的防治和预后评价提供参考依据。方法本次研究的对象来源于广西医科大学第一附属医院和附属肿瘤医院确诊为肝细胞癌的新发病例,肝细胞癌患者在纳入研究前均未进行抗肿瘤治疗。患者基本信息、肿瘤临床病理特征和治疗过程等资料通过问卷调查和查阅病案资料获取,患者手术后肿瘤复发、转移和死亡等情况通过查询就诊记录和电话随访获取。通过美国国家环境健康科学研究所(National Institute of Environmental Health Sciences,NIEHS)数据库筛选中国人群FOXO基因启动子区最小等位基因频率大于0.05的高频突变位点作为本研究的SNP位点,共筛选出3个符合要求的SNP位点,分别是位于FOXO1基因的 rs17592236(C>T)位点、位于 FOX03 基因的 rs4946936(C>T)位点和位于FOXO4基因的rs4503258(C>T)位点。利用TaqManMGB实时荧光定量PCR技术检测上述3个SNP位点基因型频率分布情况。血浆中FOXO蛋白浓度使用ELISA试剂盒检测。所有数据使用EpiData3.1软件进行双录入并进行一致性检验,统计分析运用SPSS 17.0软件进行:基因型分布频率与肝细胞癌临床特征的关联性使用χ2检验或确切概率法进行分析,并使用非条件Logistic回归模型进行多因素分析和计算校正混杂因素后的比值比(odds ratio,OR)和 95%可信区间(confidence interval,CI);FOXO基因多态性与肝细胞癌预后的关系使用乘积极限法(Kaplan-Meier-method,K-M法)和Cox比例风险模型进行分析。所有检验采用双侧检验,检验水准α=0.05。结果.(1)FXO基因多态性与肝细胞癌临床病理特征的关系研究结果显示:rs17592236位点多态性与癌栓(χ2=7.59,P=0.022)和脉管侵犯(X2=7.08,P=0.029)有关,突变纯合型TT可增加脉管侵犯发生的风险(OR=3.926,95%CI:1.333～11.568),基因型(CT+TT)可诱发癌栓的发生(OR=1.271,95%CI:1.065～1.518);rs4946936位点多态性与脉管侵犯有关(X2=4.82,P=0.028),基因型(CT+TT)可降低脉管侵犯的发病风险(OR=0.788,95%CI:0.642～0.996);rs17592236 位点和rs4946936 位点多态性与其它临床病理特征均无统计学差异,rs4503258位点多态性与所有肝癌临床病理特征均不相关(均有P>0.05)。(2)FOXO基因多态性与肝细胞癌预后的关系肝癌患者行根治性肝切除术后5年累积生存率为55.8%,5年累积无进展生存率为35.3%。K-M法分析结果显示HCC的进展与rs4946936位点和 rs17592236 位点多态性有关(X2=7.7,P=0.005和 χ2=5.7,P=0.017),两个位点均是基因型TT增加了肝癌进展的风险(HR=2.325,95%CI:1.295～4.174 和 HR=1.659,95%CI:1.042～2.643),肝癌术后无进展生存时间(progression-free survival,PFS)均出现缩短。肝癌的死亡与rs4946936位点多态性有关(X2=4.6,P=0.031),基因型TT增加了肝癌的死亡风险(HR=2.006,95%CI:017～3.956),肝癌术后总生存时间(Overall survival,OS)缩短;肝癌死亡与rs17592236多态性不相关;肝癌进展和死亡与rs4503258多态性之间均无统计学差异(均有p>0.05)。研究结果还显示肝癌为BCLC-(B+C)期者较BCLC-(0+A)期者更容易出现肿瘤进展和死亡(HR=1.51,95%C/:1.023～2.231 和 HR=1.861,95%C/:1.152～3.004),无进展生存时间和总生存时间均缩短。术前AFP浓度大于l000ng/mL的患者肝癌进展和死亡的风险增加(HR=1.593,95%CI:1.0667～2.3778 和HR1.628,995%CI:1.00002.623)。肝癌进展和死亡与是否进行综合治疗和肿瘤细胞分化程度不相关(均有p>0.05)。(3)FOX03基因多态性与FOX03蛋白浓度的关系肝细胞癌患者血浆中FOX03蛋白平均浓度为(17.53±9.69)ng/mL,FOX03蛋白浓度与rs4946936位点多态性之间无统计学差异(p>0.05)。结论(1)rs17592236位点TT基因型可增加HCC发生脉管侵犯的风险,T等位基因可增加癌栓发生的风险;rs4946936位点T等位基因可降低脉管侵犯的风险。(2)rs4946936位点基因型TT可增加肝癌进展和死亡风险,无进展生存时间和总生存时间均缩短;rs17592236位点基因型TT可增加肝癌进展风险,无进展生存时间缩短;BCLC-(B+C)期和术前AFP浓度大于1000ng/mL的患者容易出现肝癌进展和死亡。(3)血浆中FOX03蛋白浓度与rs4946936位点多态性不相关。全文结论:FOXO基因多态性与肝细胞癌临床病理特征和预后密切相关。